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道地性川贝母的生物学研究及其GF14基因的克隆

李玉峰  
【摘要】: 贝母为百合科Liliaceae贝母属Fritillaria L.多种植物的鳞茎,有悠久的使用历史,是我国重要的中药材之一,其功效是清热润肺,化痰止咳。据报导,目前我国贝母属植物有61种,50个变种,5变型。川贝母为我省的十大名贵中药材之一,因其质优效佳而名扬海内外。正是由于其良好的临床效果,广受业内人士认同,川贝母的市场价格一直在同类中名列前茅。目前市场上出现了许多其它类的贝母假冒川贝母的情况,在一定程度上造成了川贝母真伪的混乱现象。在中药现代化的进程中,中药材的来源及其品质十分重要,这对于如何更好开发、利用我国丰富的中药材资源,提出了新的课题和挑战。本论文主要是选用道地产地的川贝母与其它多种被列入中国药典且具有代表性的贝母,在生物总碱的含量、分布区域的地质构象、微量元素的含量和基因水平等方面,较为全面地从生物学角度对道地性川贝母进行研究,摸索了鉴别道地性川贝母的不同方法,为实现贝母中药制剂现代化打下一定的基础。GF14蛋白是广泛存在于植物中的参与细胞信号传递的调节蛋白,采用RT-PCR技术克隆了川贝母的一个413bp的cDNA片段。序列分析表明,该cDNA与GenBank中的GF14基因具有很高的核酸序列相似性。结合RACE技术,获得了1133bp的全长cDNA,其cDNA包含一个开放读码框,5'未翻译区和一个带有Poly(A)的3'区域。通过其保守域的结构分析,川贝母的GF14蛋白的氨基酸序列中有与其他GF14蛋白相似的酶活位点。


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