肾素—血管紧张素系统基因多态性与原发性高血压

【摘要】： 肾素-血管紧张素系统(renin-angiotensin system，RAS)在调节血压、体液和电解质平衡及心血管疾病发生中发挥重要作用。RAS系统基因是原发性高血压重要侯选基因。用DNA的多态性（包括SNPs，STR等）与疾病的连锁不平衡(linkage disequilibrium，LD)分析鉴定高血压、糖尿病等复杂疾病的易感位点正受到越来越多的重视。我们对RAS系统的血管紧张素原基因（angiotensinogen，AGT） 和血管紧张素转换酶基因（angiotensin-converting enzyme，ACE）的15个多态位点用PCR-RFLP、和最大期望值（expectation maximization，EM）算法为基础的最大似然法(maximum likelihood estimate，MLE)，对701例的样本进行了连锁不平衡状态、单倍型结构估计，同时对病例-对照样本进行了高血压病关联分析。现将结果报告如下： WP=4 第一部分：血管紧张素原基因与原发性高血压 选取AGT基因启动子区 -217, -152, -20, -6, 内含子1 的+31, 第二外显子3889（T174M）和 4072（T235M） 共7个位点，对497的样本（高血压患者298例，血压正常对照199例）进行了分析，结果发现： 1. 大部分位点存在连锁不平衡。A-6G，C+31T，C4072T三位点两两存在完全连锁不平衡(D'=1)；A-217G和G-152A位点，G-152A和3889T位点平衡传递；其余配对位点为强的连锁不平衡。 2. 本群体存在7种单倍型，并被A-6G，C+31T，C4072T分为两大类。3种最常见的单倍型为H1(-217: A, -152: G, -20: A, -6: A, +31: C, 3889: C; 4072: C), H2(-217: A, -152: G, -20: A, -6: G, +31: T, 3889: C; 4072: T)，H3(-217: G, -152: G, -20: A, -6: A, +31: C, 3889: C; 4072: C)。 3. 病例对照研究发现单倍型H7(-217: G, -152: G, -20: A, -6: G, +31: T, 3889: C: 4072: T)仅存在于对照中；单个位点分析未见与高血压关联。 4. 最大俭约法分析显示，含有G-6/T+31/T4072的单倍型被-217位点分为 H7(-217: G, -152: G, -20: A, -6: G, +31: T, 3889: C: 4072: T)和H2 (-217: A, -152: G, -20: A, -6: G, +31: T, 3889: C: 4072: T) 两种单倍型，H7在G-217A位点是G并可能与血压控制的保护性因素连锁不平衡。 WP=5 第二部分：血管紧张素转换酶基因多态性与血浆酶活性及原发性高血压 紫外法检测了204例健康个体血清ACE活性，同时检测上述健康个体和前述高血压病例-对照样本ACE基因启动子区A-5466C，T-3892C，A-240T，编码区T1237C，G2215A，G2350A 6个SNP位点，以及第16内含子的Alu片段插入/缺失（I/D）多态和3'端4656（CT）2/3多态性，发现： 1. ACE基因存在高度连锁不平衡（P＜10-4），上述8个多态性存在于常见的9个单倍体中，其中3种最常见的单倍型为A(A-T-A-T-G-I- A-3), B(C-C-T-C-A-D-G-2)和C(A-T-A-C-A-D-G-2)，A和B在每个位点都不相同。最大简约法分析提示本群体可被分为3个进化枝，C枝最有可能由单倍型A和单倍型B产生。 2. ACE基因各位点多态性在个体中的分布与血浆中ACE活性在有关，组成单倍体A的各等位位点与血浆中ACE低活性有关，单倍体B的各等位位点与血浆中ACE高活性有关。 3. 病例对照研究发现单个位点除A-240T外，其余各位点均未见与高血压关联，单倍型D的频率在高血压患者中高于对照组，由ACE低活性位点组成单倍型B的频率在患者中有升高的趋势（P=0.097）。 小结 对701例高血压患者和对照个体15种多态位点检测发现，在AGT和ACE基因区域内，用7-9个常见的单倍型可解释其大部分多态。AGT基因中H7单倍型在正常血压个体中的频率高于高血 WP=6 压组，可能与控制血压的保护性因素连锁不平衡。ACE基因中单倍型B在高血压患者中的频率高于对照组（P=0.097），且组成该单倍型的位点均为升高ACE血浆酶活性位点，因而可能与高血压易感位点连锁不平衡。此外，本研究结果支持基因剂量效应可能存在于单倍型中，而不与单个位点直接关联。