亮菌发酵工艺、亮菌多糖及药效学研究

【摘要】：本论文以一株假蜜环菌[Armillariella tabescens(Scop.ex Fr.)Sing]作为生产菌株进行研究,研究内容包括:(1)亮菌固态发酵、液体深层发酵工艺的初步研究;(2)亮菌多糖的提取纯化工艺研究及简单结构分析;(3)亮菌多糖药效学研究。主要研究结果如下: 1.亮菌固态发酵工艺研究结果:以生长状态和多糖含量为指标确定了固态发酵的最佳培养时间为45d左右;同时通过对发酵生长期间各种酶的酶活测定,对其生长代谢规律及生长状态进行了初步了解。这种发酵系统具有发酵周期长的特点,有利于多种药用有效成分的合成,但同时也是固体发酵的缺点,而且固体发酵容易染菌,产量低,不利于活性物质的提取和大规模生产。 2.亮菌液体发酵工艺研究结果:采用“复杂系统调控技术”确定亮菌发酵的最适因素及其相应量值。其最优发酵工艺条件为:葡萄糖:2.2%、土豆汁18%、麸皮汁8%、酵母粉3%、氯化铵0.27%、磷酸二氢钾0.06%、温度280C,转速120r/min,摇瓶装量55ml/250ml,发酵液起始PH5.5,接种量7%,发酵时间5.5d,菌丝体干重达到3.83g/100ml,比现有文献报道值提高了约67.63%。我们对亮菌深层液体发酵条件的优化调控及发酵中菌体生长规律及产物代谢特点的了解,为将来应用于工业化大规模发酵生产提供了一定的理论依据。 3.采用单因素实验和多因素正交试验,初步筛选出固态发酵提取多糖的最佳条件为:浸提温度90℃、浸提时间2.5h、固液比1:5。 通过实验证明了采用反复冻融和高速离心的方法来处理液体发酵产物提取亮菌胞内多糖,可以减少工作量及多糖活性的破坏,并且使多糖的提取率提