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线粒体DNA多态的变性高效液相色谱分析及其法医学应用研究

王旭东  
【摘要】:目的 建立新的mtDNA多态遗传标记的变性高效液相色谱检测技术,为法医学疑难检材的检测提供新的技术手段;利用变性高效液相色谱技术,寻找适合作为法医遗传标记的mtDNA编码区多态遗传标记,以期提高mtDNA在法医学检测中的应用价值。方法 应用primer3引物设计软件,对mtDNA控制区和编码区分别设计引物,用以进行PCR扩增。通过构建DNA池及样本间两两比较的方法,确定DHPLC发现异源双链的效能,从而建立mtDNA多态分析的DHPLC方法。用建立的方法,在成都汉族群体120名无关个体中,对mtDNA编码区各基因座进行多态性研究,获得等位基因及单倍型频率、变异度及标准误,并进行种属特异性、组织同一性以及陈旧骨骼、毛干等法医学疑难检材的DHPLC分析。结果 应用DHPLC技术,对两个mtDNA控制区基因座的扩增产物成功进行了异源双链分析,建立了适合法医学快速检测的DHPLC方法。针对mtDNA编码区总计1435bp范围,成功建立了DHPLC分析方法。根据我们设计的分析片段的位置,把此mtDNA编码区定义为7个基因座,分别称为C、D、E、F、G、H和I基因座。对七个mtDNA编码区基因座的多态性分析显示,变


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