小鼠耳蜗螺旋神经节细胞的电生理学研究及顺铂对其钾电流的影响
【摘要】:目的:耳蜗螺旋神经节细胞是听觉系统的初级神经元,了解它的基本电生理学特性及耳毒性药物的致病机理对于阐明听觉的形成机制和保护听觉功能意义重大。本研究通过不需酶培养耳蜗螺旋神经节细胞,获得稳定可靠的理想实验材料,并进行全细胞构型电压钳记录,观察耳蜗螺旋神经节细胞基本电生理学特性以及耳毒性药物顺铂对其钾电流的影响,以期了解顺铂耳毒性的离子机制。
方法:对初生1-5天以内的昆明种乳小鼠的耳蜗进行解剖、分离,获得螺旋神经节组织,进行原代培养,并应用NF-200单克隆抗体进行免疫荧光细胞学鉴定;应用全细胞构型电压钳制技术,采用不同的浴液、电极内液及阻断剂,在不同的刺激参数下进行记录不同的离子电流;在记录到钾电流后,浴液中分别加入不同浓度的顺铂溶液,观察它对钾通道电流电生理学特性的影响。
结果:实验获得了理想的螺旋神经节细胞,其形态表现为胞体呈椭圆形,具有双极或单极突起,突起的起始部分较窄。应用荧光免疫细胞学方法可以清晰地显示之,且不易与神经胶质细胞和成纤维细胞等其它细胞混淆,并能对其定性。实验记录到了内向的钠电流、延迟整流钾电
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