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人β-防御素-1基因表达与转录调控

祝秉东  
【摘要】:人β-防御素-1(hBD-1)是一重要的抗菌肽分子,广泛表达于分泌腺和皮肤粘摸的上皮细胞中,具有重要的抗感染功能。长期以来hBD-1被认为固有表达于各种组织,不被脂多糖(LPS)等所诱导。然而近来越来越多的研究表明hBD-1mRNA的表达水平可以被某些微生物及炎性介质上调。我们实验室发现卡介苗胞壁蛋白组分能够刺激人肺腺上皮细胞SPC-A-1中hBD-1 mRNA的表达增强四倍左右。hBD-1基因已被克隆,有两个较小的外显子中间隔一6962 bp的内含子。和人β-防御素-2(hBD-2)等抗菌肽不同,hBD-1基因调控序列中未发现NF-κB位点。然而,对hBD-1基因启动子活性和转录调控机制尚缺乏系统的研究。本实验即针对这些问题展开研究,并着重探讨BCG增强hBD-1基因转录的调控机制。 首先,由于hBD-1基因的表达有组织特异性,我们运用RT-PCR和Northern杂交方法探讨了hBD-1基因在一些细胞株的表达情况。实验表明肺腺上皮细胞SPC-A-1、肺上皮细胞A549和单核细胞THP-1表达hBD-1 mRNA。而在脐静脉血管内皮细胞ECV304、纤维母细胞FB和Ad5DNA转化的胚肾细胞株293中未检测到hBD-1的表达。其中单核细胞THP-1表达hBD-1 mRNA是首次被发现。 其次,我们对hBD-1基因不同长度启动子的启动活性做了研究。我们将不同长度的hBD-1基因5′-端上游序列连接入无启动子的绿色荧光蛋白


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