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免疫抑制剂致慢性移植肾肾病的非免疫学机理研究

高锐  
【摘要】:目的 了解不同免疫抑制剂对于血管平滑肌细胞(VSMC)和移植肾组织中TGF-β1和Smads信号传导系统的影响机制及其临床意义。 方法 (1) 大鼠胸主动脉VSMC体外原代培养,以空白处理为对照组,实验组分别用CsA(3μg/ml)、FK506(1μg/ml)、MMF(0.3μg/ml)和RPM(10μg/ml)给予干预,分别处理6h和12h后收取标本。采用免疫组化和实时荧光定量PCR检测各组各时相标本中TGF-β1、Smads蛋白和mRNA在VSMC中的定位及表达。(2)建立SD→Wistar大鼠强化缺血再灌注损伤移植肾加速慢性排斥模型。实验分为6组:假手术组、对照组、(CsA6mg/(kg.d))组、FK506(0.15mg/(kg.d))组、MMF(20mg/(kg.d))组、RPM(0.8mg/(kg.d))组,每组每个时间点动物为8只。除假手术组外的其它各组动物于原位肾移植后当天即开始使用CsA10mg/(kg.d)×10d,以避免急性排异反应,10d后各实验组开始应用不同免疫抑制剂进行干预处理直至相应时间点。分别于术后4、8及12W时处死实验动物,采用免疫组化和实时荧光定量PCR检测TGF-β1、Smads蛋白和mRNA在肾脏中的定位及表达。 结果 免疫组化显示TGF-β1、Smad2和Smad7主要定位于VSMC的细


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