同型半胱氨酸致血管内皮细胞损伤机制的研究

【摘要】：研究背景与目的:同型半胱氨酸(Homocysteine,Hcy)是一种含硫氨基酸,体内不能合成,只能来源于蛋氨酸的分解代谢,在体内主要以蛋白结合形式存在。其生理作用主要是参与体内一碳单位的代谢。目前公认,体内Hcy浓度升高是导致心血管疾病的独立危险因素之一。因此,对同型半胱氨酸在各种心脑血管疾病发病机制中所发挥作用的深入研究具有重要的理论和应用价值。研究表明,Hcy对血管内皮细胞的损伤作用是其致病机制的始动因素。但Hcy内皮损伤机制的研究没有得出一个系统的有说服力的结论。本次研究的主要目的是利用蛋白质组学研究的理论和技术,对Hcy作用后的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的蛋白质表达谱进行观察和分析,寻找与Hcy作用相关的蛋白质改变,更全面的了解Hcy所引起的细胞内功能蛋白的变化,为Hcy致血管内皮损伤机制的研究提供新的数据。 材料与方法:运用流式细胞技术对Hcy作用后的HUVEC进行细胞凋亡检测;用凋亡相关基因芯片技术获得Hcy作用后的HUVEC凋亡相关基因表达谱,利用RT-PCR、Western Blot对其结果进行验证,全面分析Hcy诱导血管内皮细胞凋亡的信号通路;采用2DE-MS技术路线对Hcy作用下的HUVEC蛋白质表达谱进行研究,并运用生物信息学数据库对Hcy作用后发生改变的蛋白质进行功能分析和相互作用分析。