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雷公藤甲素抗血管生成的作用及机理研究

丁怡  
【摘要】:血管生成是源于已有的毛细血管和后微静脉的新毛细血管的形成。血管生成的过程主要包括:血管基底膜的降解,血管内皮细胞的迁移、增殖以及毛细血管管腔的形成。近来提出,控制新生血管的生成是一条新的治疗血管生成相关疾病的有效途径。血管内皮细胞是针对血管生成治疗的主要靶点。已有研究发现雷公藤甲素具有抗肿瘤、抗炎、抗生育和调节免疫等的作用,但其抑制血管生成的作用和机制尚不明确。本研究利用体外培养人脐静(human umbilical vein endothelial cell, HUVEC),传至第三代,加入不同浓度的雷公藤甲素(0,5,10,20,30μg/L)、地塞米松(300mg/L)后培养不同时间,计数细胞来绘制细胞生长曲线;采用[~3H]-TdR掺入法和MTT还原法来反映细胞的增殖情况;琼脂糖凝胶培养检测内皮细胞的迁移活性;胶原胶上三维培养观察小管结构形成情况;利用鸡胚尿囊膜在体观察雷公藤甲素对血管生成的影响;免疫组织化学方法检测内皮细胞尿激酶型纤溶酶原激活物(urokinase-type plasminogen activator, u-PA)和组织纤溶酶原激活物(tissue-plasminogen activator, t-PA)的蛋白表达量,并进一


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