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IP-10基因治疗联合吉西他滨抗肿瘤实验研究

梅开  
【摘要】:趋化因子(chemokine)是一类小分子物质,有诱导体内白细胞运输的功能。IP-10(Interferon-γ-inducible protein 10)是α趋化因子家族成员,具有抗血管作用,表现为抑制新生血管的形成。许多文献报道IP-10具有抑制肿瘤血管的作用,而且还有研究表明,化疗与抗肿瘤血管治疗结合具有协同作用。但IP-10基因治疗联合化疗药物吉西他滨治疗肿瘤尚未见报道。本研究拟用IP-10基因与化疗药物吉西他滨联合,观察抗小鼠肿瘤作用并初步探讨其作用机理。 首先将pBLAST IP-10质粒转化至大肠杆菌E-coli JM109中,挑取单菌落经培养扩增后,制备并纯化质粒。采用脂质体转染法将IP-10质粒DNA导入COS细胞,免疫印迹法(Western blot)及ELISA方法检测转染上清中IP-10的表达,观察表达IP-10蛋白的上清联合吉西他滨对体外培养的内皮细胞(HUVEC,SVEC)的增殖抑制情况。结果表明转染IP-10基因的COS细胞能表达具有生物学活性的IP-10蛋白,IP-10联合吉西他滨能增强抑制内皮细胞的增殖。 研究IP-10基因在小鼠体内的表达,分别以不同剂量的IP-10质粒DNA肌肉注射,ELISA方法检测不同的时间点小鼠血清中IP-10蛋白表


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