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临床分离的铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药的分子机理的研究

刘蓉  
【摘要】:[目的]:铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa PA)是假单胞菌中最常见的院内感染条件致病菌。目前临床耐药性及耐药水平发展较快,成为医院感染监测细菌的重点,引起了人们的极大重视。 近年随着亚胺培南在临床上的广泛应用,使得铜绿假单胞菌对亚胺培南也呈现出逐年增加的趋势。 本实验目的为了调查成都地区铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药机制。 [方法] 采用琼脂二倍稀释法检测临床分离62株铜绿假单胞菌对亚胺培南、美洛培南、头孢他定等几种常用抗菌药物的MIC值。用PCR方法和SDS-PAGE蛋白电泳方法检测铜绿假单胞菌外膜蛋白OprD_2缺失情况。利用巯基乙酸以及EDTA与亚胺培南纸片联合法检测细菌产金属酶情况。用CCCP抑制试验检测细菌是否存在主动外排泵,同时利用RT-PCR方法检测耐药菌株与敏感菌株之间在OprM和OprN表达差异。 [结果] 62株临床分离的铜绿假单胞菌对亚胺培南、美洛培南、左氧氟沙星、环丙沙星、氨曲南、头孢吡肟、头孢哌酮、头孢他定、阿米卡星耐药率分别为45.16%、29.03%、46.80%、46.00%、56.00%、27.42%、58.06%、30.64%、12.20%。通过PCR扩增发现了11株铜绿假单胞


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