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高羊茅内生真菌的分离、鉴定及其生物防治的初步研究

张晓娟  
【摘要】:禾草内生真菌在寄主体内渡过全部或几乎全部生活周期而不表现任何症状,与宿主互惠互利,提高宿主对生物胁迫(抗虫、抗菌等)和非生物胁迫抗性的能力,使得共生体系具有较强的竞争力。禾草内生真菌产生丰富多样的次生代谢产物,具有多种生物活性,对害虫和植物病原菌起到抑制和灭杀作用,这些优良特征能够使内生真菌有望成为生物农药。因此对禾草内生真菌在植物病害生物防治方面的研究不但具有经济价值和生态学意义,还有现实的理论意义。 本文从高羊茅交战Ⅱ的植物组织中分离内生真菌,利用形态学和分子生物学的方法对之鉴定,筛选内生真菌抑菌谱,并对抑菌机理做了研究,试验结果如下: 1.高羊茅内生真菌的分离与鉴定 采用苯胺兰染色法检测多年生黑麦草和高羊茅部分商业品种的种子,高羊茅交战Ⅱ种子的内生真菌感染率最高,达到73%。 用组织捣碎的固液分离法从高羊茅交战Ⅱ植株分离得到6株白色菌株,通过组织印迹以及孢子灭活试验证明所分离的菌株为内生的。 从形态学和分子生物学两方面鉴定6株内生真菌。6株真菌按形态划分为2个菌群,菌Ⅰ(J21、J22、J25、J26)电镜扫描观察孢子形状为肾形,长约6.4-10μm,分子生物学鉴定采用AP-PCR的方法,在0.7,0.9,2.1kb左右出现条带。菌Ⅱ(J23、J24)电镜扫描观察分生孢子形状为长卵形,4.1-7.2×


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