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和厚朴酚作用卵巢癌细胞株的蛋白质组学研究

边策  
【摘要】:实验目的:采用蛋白质组学技术,对和厚朴酚作用卵巢癌细胞引起的蛋白表达变化进行检测,并鉴定表达差异的蛋白质分子,并初步探讨和厚朴酚抗肿瘤作用的机制。 实验方法:用和厚朴酚(15μg/ml)作用人卵巢癌SKOV3细胞6小时,收集、裂解细胞,提取细胞内总蛋白;以固相IPG胶条(17cm,pH3-10)为载体进行第一向等电聚焦和第二向SDS-PAGE电泳;考马斯亮蓝染色,比较实验组与对照组蛋白质表达,切取差异点;用ESI-Q-TOF MS检测差异点包含的主要蛋白。 实验结果:用和厚朴酚(15μg/ml)作用人卵巢癌SKOV3细胞6小时收集细胞内总蛋白进行双向电泳后找到明显表达差异点8个;通过质谱检测发现经过和厚朴酚处理后表达上调的蛋白包括不均一核糖核蛋白家族、碳酰还原酶家族、钙结合蛋白家族、磷脂酰乙醇胺结合蛋白、角蛋白家族;表达下调的蛋白包括膜联蛋白、LIM and SH3家族、丙酮酸激酶家族。 结论:和厚朴酚处理人卵巢癌细胞SKOV3后可以引起一些细胞蛋白质表达的改变,这些蛋白质参与了细胞RNA的代谢、细胞分化、细胞转化、细胞迁移等过程,提示和厚朴酚可能通过以上述蛋白为靶点,影响卵巢癌细胞的RNA代谢、细胞分化、细胞转化、细胞迁移等过程从而发挥其抗肿瘤的作用。


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