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糠秕马拉色菌胞外蛋白酶活性测定

陈伟  
【摘要】:目的:①检测糠秕马拉色菌胞外蛋白酶活性;②研究菌丝相及酵母相蛋白酶活性的差异;③蛋白酶活性的影响因素。 方法:选用糠秕马拉色菌标准株,接种于菜籽油液体培养基和菌丝液体培养基中振荡培养,诱导糠秕马拉色菌菌丝相及酵母相生成,收集培养上清液。用全脂牛奶平板法、Folin-酚法、QuantiCleave蛋白酶试剂盒测定菌丝相及酵母相糠秕马拉色菌胞外蛋白酶的活力,并检测温度、pH值对蛋白酶活性的影响。 结果:①全脂牛奶平板法:培养第7天菌丝相上清液蛋白酶活性(12.5±1.2mm)高于酵母相(9.25±0.71mm)(p<0.05);菌丝相上清液蛋白酶活性随培养天数延长而增大;25℃和37℃两种温度对上清液蛋白酶活性无明显影响(P>0.05);②Folin-酚法:上清液蛋白酶活性随培养天数、菌落计数、菌丝诱导率增加而增大,培养液pH值呈下降趋势;同一天的菌丝相上清液蛋白酶活性明显高于酵母相(p<0.05);三种温度(25℃、37℃、49℃)及三种pH值(3.8、5.6、7.4)对上清液蛋白酶活性无明显影响;温度37℃、pH5.6时菌丝相上清液蛋白酶活性最高;③QuantiCleave蛋白酶试剂盒:菌丝相及酵母相上清液中均含有蛋白酶且


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