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DNA分析在法医学种属鉴定中的应用研究

王闯  
【摘要】:种属鉴定(species identification)在法医学中占有重要的地位,其主要任务是鉴定法医学生物性检材的种属来源,确定检材是否来自人体,必要时还需要确定检材来自何种动物。种属鉴定采用的方法主要有三类,即形态学方法、血清学方法和DNA技术检测方法。与蛋白质相比,DNA分子相对稳定、特异,所以DNA分析方法有助于对微量、降解和腐败检材的鉴定。利用DNA分析进行种属鉴定是目前法医学研究的热点。目的本课题旨在研究17个新的STR基因座和肿瘤抑制基因TP53第八内含子的种属特异性;建立mtDNA细胞色素b(cyt b)基因PCR-RFLP分析以及复合扩增mtDNA—HV Ⅰ、HV Ⅱ和cyt b片段进行法医学种属鉴定的方法。研究上述方法在种属鉴定中的价值和可行性。方法以人和十七种常见动物为研究对象,提取DNA定量后。(1)分别扩增17个STR基因座和TP53第八内含子,聚丙烯酰胺凝胶电泳、银染检测,分析各基因座和TP53第八内含子的种属特异性。(2)扩增cyt b基因,根据扩增产物的有无初步区分部分动物,对于有扩增产物的动物,选择限制性内切酶(Alu Ⅰ)对扩增产物酶切,分析酶切产物,进行种属鉴定。(3)复合扩增mtDNA-HV Ⅰ、HVⅡ和cyt b片段,PAGE、银染显色后分析结果。结果(1)D9S1118和D20S604基因座对各动物DNA均无扩增产物;DXS101、DYS391和D20S161基因座只对猴DNA有扩增产物;D2S1774基因座对猴和鼠DNA有扩增产物;


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