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奶牛体细胞计数法与干扰素-Tau基因的克隆、表达

刘苏萌  
【摘要】:乳房炎对奶牛养殖业危害十分大,乳房炎的发生可以通过体细胞计数的方法进行监测,特别对于亚临床型乳房炎,越早监测出越有利于预防临床乳房炎的发生及改善牛群的整体健康状况。目前对于体细胞计数有加利福尼亚细胞数测定(California Mastitis Test,CMT),威斯康辛乳腺炎试验(Wisconsin Mastitis Test,WMT),电子体细胞计数法,显微镜直接计数法等许多方法,其中CMT操作简单但只能得出体细胞值的一个相对范围,不能得到精确的值;WMT虽能得到准确的体细胞值但是实验操作复杂;DHI操作简单准确但需要专门的计数仪器、价格昂贵。本实验通过荧光染色的方法,运用荧光显微术对3个取样点总计39头奶牛乳汁中的体细胞分别进行三次计数,取三次计数结果的平均值作为每头奶牛的体细胞值,并结合各奶牛场管理条件对结果进行了分析,表明吖啶橙染色是一种快速、准确的监测奶牛体细胞数的方法,同时还表明不同的饲养条件及管理会造成牛群健康状况的显著差异,并依据实验结果对改善牛群的健康状况提出了建议。 本实验还根据已知的牛Bos taturus干扰素-τ(Interfcron-Tau,IFN-τ)基因Genbank登录号分别为AF238611(IFN-τ-C3)、AF238612(IFN-τ-C2)、AF238613(IFN-τ-C1)和一个印度水牛Bubalus bubalis IFN-τ基因,Genbank登录号AY535404的四个核苷酸序列设计出IFN-τ的克隆引物。从冻存的荷斯坦奶


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