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铜绿假单胞菌噬菌体、QS系统与生物被膜的相关研究

谢轶  
【摘要】:铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)又称为绿脓杆菌,具有极强的环境适应能力和对多种抗生素的耐受能力。对于人体而言,铜绿假单胞菌是最重要的条件致病菌之一,它常常引起创伤、烧伤及免疫受损机体严重的感染,危害人类的健康与生命。在铜绿假单胞菌中噬菌体研究、QS(Quorum Sensing)系统研究和生物被膜研究已经成为当前热点。 本研究包括以下三部分内容: 1、铜绿假单胞菌噬菌体的分离以及生物学特性研究 从四川大学华西医学中心污水中分离到一株铜绿假单胞菌溶原性噬菌体,该噬菌体的宿主为一株临床分离的环丙沙星耐药株PA0315(MIC64mg/L)。电镜照片显示该噬菌体大小约为230nm,具有典型的复合体对称结构,属肌尾噬菌体科,命名为PPA5。根据DNA斑点杂交结果,发现PPA5为溶原性噬菌体,最佳感染复数(MOI)为0.1。PPA5感染宿主的潜伏期为1.5h,裂解期为2.0h,裂解量为31。限制性内切酶酶切结果显示,噬菌体DNA为环状dsDNA,其基因组大小约为35kb—45kb。PPA5在自然条件下组成型表达约10多种蛋白,包括各种结构蛋白和功能蛋白。这些数据为下一步研究噬菌体的序列以及噬菌体与宿主菌的生理关系奠定了基础。


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