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纳米脂质体包裹P53治疗鼻咽癌的研究

刘海  
【摘要】:目的:以纳米材料为载体包裹目的基因治疗(GT)肿瘤已成为目前抗肿瘤治疗的一种新策略。其中作为药物载体的纳米颗粒在基因治疗方面将大展身手。现基因治疗被视为治疗癌症、遗传病等疾病很有希望的临床治疗手段。其关键技术是基因转移,即如何将外源基因有效的导入目的细胞。由于目前传统的病毒和非病毒载体介导系统存在毒性、免疫原性等安全隐患或转染效率不高等缺陷,制约了当今基因治疗的发展与应用。纳米颗粒基因转移技术以纳米颗粒作为基因转移载体,即将DNA、RNA等基因治疗分子包裹在纳米颗粒之中或吸附在其表面。由于纳米颗粒径粒很小,具有表面效应和体积效应,即大量的自由表面,使得纳米粒子上的官能团和选择性吸附能力变大,达到吸附平衡的时间大大缩短,粒子的胶体稳定性显著提高,从而能有效介导DNA的转导,并使其在细胞内高水平表达。纳米脂质体作为纳米载体家族中的一员,它不仅表现了纳米技术的优点,而且还拥有脂质体(LIPO)本身的一些特性。比如:无毒性及无免疫原性,可在体内降解、酷似细胞结构,有生物膜的特性和结构、对网状内皮系统(RES)有趋动性,即被动靶向性、被包裹的药物性质不变,毒性降低,可缓慢释放等。本研究拟通过纳米脂质体包裹p53基因转染鼻咽癌(NPC)细胞,观察细胞体外生长变化和裸鼠体内肿瘤生长变化情况,为以后鼻咽癌的治疗开辟一条新的路径。 方法:(1) p53质粒DNA的纯化及提取:将质粒DNA与大肠杆菌DH5α感受态细胞混合后在琼脂平板表面扩增10-14小时,然后离心并依次


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