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布氏乳酸杆菌生长特性及其S-层蛋白的研究

戴甄  
【摘要】:乳酸菌是一类近年来国内外研究较多的益生菌,乳酸菌自身及其代谢产物对人和动物具有保健和治疗疾病的效果。布氏乳酸杆菌与其他乳酸菌相比较,国内外对其了解还不充分,因此对其生理、生化特性及其相关代谢产物的研究具有一定的科学意义和应用价值。 实验利用改良的MRS培养基从泡菜发酵汁,发酵青贮饲料等富含乳酸杆菌的介质中分离出6株乳酸菌,经过16S rDNA鉴定,它们分别为乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)、植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)、戊糖乳杆菌(Lactobacillus pentosus)、干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)、布氏乳酸杆菌(Lactobacillus buchneri)。通过SDS-PAGE分析上述菌株S-层蛋白显示,与分离的其他几株乳酸菌相比较,实验分离出的布氏乳酸杆菌(布氏乳酸杆菌LBZ8菌株)表层含大量S-层蛋白,为此本实验以LBZ8菌株为研究对象,对该菌生长及其相关特性进行研究,结果显示,LBZ8对1.Ommol/L的过氧化氢(H2O2)具有很强的耐受能力,对超氧阴离子(O2-)、羟自由基和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH)的清除能力分别达到43.12%、86.52%、40%。与文献报道比较显示出较强的抗氧化性能。发酵试验研究结果表明,该菌发酵液中γ-氨基丁酸(GABA)的含量为11.588mg/ml, D-甘露醇含量为19.46mg/ml。抑菌试验研究结果表明,LBZ8的发酵液对大肠杆菌(Escherichiacoli),白色念球菌(Canidia Albicans)具有一定的抑制生长的作用,但对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的抑制效果不太明显。LBZ8的发酵液对上述病原菌具有很强的凝集作用,能够使微生物细胞大量的沉集。用PAGE胶蛋白微量回收试剂盒纯化得到的S-层蛋白,对大肠杆菌,金黄色葡萄球菌,猪链球菌(Streptococcus suis)和白色念球菌,具有一定的粘附性,能够绑定到微生物细胞的细胞表面,同时能促进这些微生物细胞凝集。 本课题所分离的布氏乳酸杆菌LBZ8生长迅速,具有很强的抗氧化和自由基的清除能力,其代谢产物中含有GABA和D-甘露醇,对大肠杆菌和白色念珠真菌具有抑制作用,同时该菌能在细胞表面表达大量的S-蛋白。S-层蛋白能够帮助微生物细胞在不良的环境中保持细胞完整的活性,帮助乳酸杆菌定植于小肠上皮细胞上,减少病原菌的定植, 布氏乳酸杆菌LBZ8这些特性为该菌在医疗、食品、饲料等领域的应用提供了可能,具有一定的开发利用价值。


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