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峨参提取物和峨参内酯衍生物抗肿瘤活性及对细胞凋亡的观察

马保玉  
【摘要】:目的: 探讨5-(3-甲氧基-1-丙烯)-1,3-苯并二氧杂茂(13号)和鬼臼苦素(15号)对HepG2、A549、Hela及MG-63四种肿瘤细胞体外抗肿瘤活性研究;探讨峨参内酯、13号、15号及4’-去甲基峨参内酯(0号衍生物)对Bcl-2、Bax作用观察;探讨峨参内酯、13号、15号、0号衍生物对四种肿瘤细胞周期及凋亡的影响。 方法: 采用MTT比色法检测不同浓度(0、5、10、20、40、80、160ug/ml)13号、15号对HepG2、A549、Hela及MG-63细胞增殖抑制作用;采用Elisa试剂盒检测峨参内酯、13号、15号、0号衍生物对HepG2、A549、Hela及MG-63肿瘤细胞Bcl-2、Bax作用观察,以峨参内酯、13号、15号、0号衍生物作为观察组,紫杉醇作为阳性对照组,以0.1%DMSO作为空白对照组,观察作用48h后Bcl-2及Bax的变化;采用流式细胞仪Propidium Iodide (PI)检测细胞周期进程及凋亡的影响,以峨参内酯、13号、15号、0号衍生物作为观察组,紫杉醇作为阳性对照组,以0.1%DMSO (Oug/ml)作为空白对照组。 结果: 1.13号对A549、HepG2、MG-63、HeLa四种肿瘤细胞均有一定的增殖抑制作用,其IC50分别为403.023μg/ml、83.893μg/ml、274.191μg/ml、95.086μg/ml;15号对A549、 HepG2、MG-63、HeLa四种肿瘤细胞均有明显的增殖抑制作用,其IC50分别为41.912μg/ml、81.574μg/ml、72.840μg/ml、16.582μg/ml。且随着药物浓度增加,其抑制率越高,故呈药物浓度依赖性。 2.通过ELISA试剂盒检测表明,紫杉醇组与空白对照组比较,作用四种肿瘤细胞48h后Bcl-2/Bax比值明显降低,且有显著性差异(P0.05);峨参内酯组与空白对照组比较,作用四种肿瘤细胞48h后Bcl-2/Bax比值明显降低,且有显著性差异(P0.05);13号与空白对照组比较,仅作用Hela、MG-63细胞48h后Bcl-2/Bax比值明显降低,且有显著性差异(P0.05);15号与空白对照组比较作用HepG2、MG-63及A549细胞48h后Bcl-2/Bax比值明显降低,且有显著性差异(P0.05);0号衍生物组与空白对照组比较作用四种肿瘤细胞48h后Bcl-2/Bax比值明显降低,且有显著性差异(P0.05)。 3.通过流式细胞术检测峨参内酯、13号、15号及0号衍生物对四种肿瘤细胞周期进程及凋亡表明,随着作用时间的增加,G0/G1期细胞百分数逐渐降低,G2/M期细胞百分数变化不大,而S期细胞百分数逐渐上升,故说明峨参内酯、13号、15号、0号衍生物阻滞四种肿瘤细胞于S期,且细胞sub-G1细胞亚二倍体凋亡峰随着时间的增加而增多,故说明峨参内酯、13号、15号、0号衍生物具有诱导四种肿瘤细胞凋亡的作用。 结论: 13号和15号对A549、Hela、HepG2及MG-63肿瘤细胞具有明显的增殖抑制作用,且与作用时间-药物浓度呈一定关系;峨参内酯、13号、15号及0号衍生物通过上调Bax、下调Bcl-2,促进肿瘤细胞凋亡;峨参内酯、13号、15号及0号衍生物具有诱导肿瘤细胞凋亡的作用,同时还可使细胞周期进程发生变化。


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