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饲粮添加叶酸对断奶仔猪生产性能和免疫功能的影响研究

高庆  
【摘要】:本研究分别建立仔猪免疫抑制和免疫激活模型,考察饲粮添加叶酸(FA)水平对断奶仔猪生产性能和免疫功能的影响,初步探讨了FA免疫调节功能和提高抗病力的机制,分别确定了不同免疫状态下断奶仔猪饲粮中FA的适宜添加量,为开发应用FA抗病营养提供了理论依据。研究共包括三个试验。 试验一圆环病毒-Ⅱ攻击和饲粮叶酸水平对断奶仔猪生产性能和免疫功能的影响 试验在圆环病毒-Ⅱ(PCV-2)阴性猪群中选择出45头初始体重为8.44±0.12kg的健康去势DLY仔猪,28±ld断奶后即饲喂添加不同水平FA(0,0.3和15mg/kg)的处理饲粮7d,第8天早上再以PCV-2攻毒每种饲粮处理中的一半仔猪建立模型,继续饲养28d。血样和组织样分别采集于第1d、第7天(攻毒前)、第21d和第35d。试验测定了各处理组仔猪生产性能、腹泻程度、器官指数、小肠形态、肺脏和淋巴组织病变、骨髓细胞增殖与凋亡、外周淋巴细胞凋亡和淋巴细胞亚群、血清免疫球蛋白和细胞因子水平的影响。结果表明:(1)有效地实施了PCV-2攻毒建模:PCV-2攻击显著降低了仔猪生产性能,并加剧了免疫抑制与组织损伤。(2)无PCV-2攻击下,各组仔猪因断奶应激强烈而出现程度不同的免疫组织损伤;饲粮添加FA15mg/kg明显改善了免疫机能:减轻了淋巴组织病变,增加了外周CD3+CD4+和(?)CD3+CD4+/CD3+CD8+提高了骨髓细胞增殖活性,影响骨髓细胞和外周淋巴细胞凋亡,使机体免疫状态得以改善。(3)PCV-2攻击下,因摄食基础饲粮导致机体FA缺乏而加剧了免疫抑制和组织病变;饲粮添加FA0.3mg/kg,较基础饲粮组减轻了淋巴组织病变,增加了外周CD3+CD4+和CD3+CD8+,提高了后期骨髓细胞增殖活性,降低了骨髓细胞细胞凋亡,可一定程度缓解PCV-2导致的免疫抑制;饲粮添加FA15mg/kg,仔猪前期外周淋巴细胞凋亡比例下降,后期骨髓细胞增殖活性较低,有利于PCV-2在体内的传播和复制,不利于仔猪耐受PCV-2后免疫系统修复。(4)有、无PCV-2攻击下,饲粮FA同一添加水平在断奶仔猪生产性能和免疫功能上的效应不同,适宜的添加剂量应不相同。 试验二6-10kg断奶仔猪饲粮中叶酸适宜添加水平的研究 试验采用单因素随机区组设计,共选用体重为6.93±0.07 kg的长大杂交(6,阉割)仔猪108头,21±1日龄断奶后即按体重分到36个圈,以添加FA水平不同(0、0.3、3、6、9和15.0 mg/kg)的试验饲粮饲喂。每个饲粮处理6个重复(圈),每个重复3头猪。试验期24d。试验结束时采集血样;测定了断奶仔猪生产性能、外周淋巴细胞亚群以及血清中FA、一氧化氮(NO)、免疫球蛋白G(IgG)和细胞因子(IFN-γ、TNF-α和IL-4)的含量。结果显示,饲粮添加FA水平有影响第24d BW、8-24d和0-24d ADG的趋势(P0.1),极显著影响8-24d和0-24d G/F(P0.01);断奶期饲粮添加FA 0.3-3mg/kg即显著提高了外周CD3+CD8+的比例(P0.05),降低了CD3+CD4+/CD3+CD8+(P0.05)和提高了血清IFN-γ水平(P0.05)。结果表明,断奶期饲粮中添加FA可以改善仔猪免疫机能和增进抗病毒能力;改善仔猪的生产性能并主要体现在提高饲料效率上;在0-7d和8-24d维持仔猪最佳生产性能的FA适宜摄入量分别为1.4-1.5mg/d和2.9-3.0mg/d。 试验三仔猪饲粮添加叶酸缓解脂多糖免疫激活作用的研究 试验以添加不同FA水平(0、0.3、3.0、6.0、9.0和15.0mg/kg)的试验饲粮饲喂断奶仔猪24d后,按4×2+2因子设计,每种饲粮处理各选择仔猪7头进行脂多糖(LPS)攻毒(在试验第1、4和7d按LPS 200μg/kg BW肌肉注射),另以4个饲粮处理组(添加FA水平为0、0.3、3.0和9.0 mg/kg)的仔猪7头不攻毒(相应注射等体积生理盐水)作为对照,建立仔猪免疫激活模型。试验共选用了45±1日龄、初始体重为10.89±0.14 kg的长大杂交(♂,阉割)仔猪70头,并按体重相近配对分入10个处理组。每处理7个重复,一个重复一头猪,单圈饲养。分别在第7d注射LPS后3小时和第21d试验结束时采血。试验测定了仔猪生产性能,外周淋巴细胞亚群(CD3+、CD3-CD4+、CD3+CD8+)以及血清中葡萄糖、皮质醇、NO、IgG和细胞因子(IL-1β、IL-4、IL-10和TNF-α)的含量。结果显示:(1)本试验实施的LPS攻毒极显著降低了仔猪0-14d生长性能(包括ADG、ADFI和G/F,P0.01),血清皮质醇、葡萄糖、IL-1β, IL-10和TNF-α含量激增,外周CD3+CD8+极显著下降(P0.01),而CD3+CD4+/CD3+CD8+上升(P0.01),激活并损伤了免疫系统,有效建立了免疫激活模型。(2)无LPS攻毒下,FA临界缺乏的基础饲粮导致仔猪生产性能下降,外周CD3+和血清NO降低;饲粮中添加适宜剂量的FA对于维护仔猪免疫系统的正常发育,以及获取较优生产性能具有必要性。(3)LPS攻毒下,饲粮FA添加剂量影响仔猪的免疫功能:添加FA 3-15mg/kg可部分缓解机体应激和炎性反应;添加FA15mg/kg可促进外周CD3+细胞的增殖分化来缓解LPS损伤,且可调节Th1/Th2平衡和增进体液免疫。饲粮添加适宜剂量的FA对于恢复期中的仔猪,具有增进机体恢复、促进生长和提高饲料效率的效应。(4)有/无LPS攻毒下,饲粮添加FA的效应不尽相同,适宜添加剂量不相同。本试验无LPS攻毒条件下,仔猪对FA的适宜摄入量:0-7d为3.6-4.3mg/d;8-21d为0.44-0.55mg/d;LPS攻毒条件下,仔猪在攻毒期间及后继恢复过程中对FA的适宜摄入量:0-7d为7.2 mg/d,8-14d为6.7-7.2 mg/d,1 5-21d为4.0-4.5mg/d。 研究结果表明,仔猪断奶期饲粮FA临界缺乏可导致机体免疫细胞增殖分化不足,抗病毒能力下降,免疫系统易于被激活,生产性能下降。饲粮中添加FA能显著提高血清FA含量,改善生产性能,提高ADG和G/F;可以起免疫调节作用:增进免疫细胞增殖分化,影响免疫分子分泌,可调节外周CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+,能缓解免疫应激的危害。不同免疫状态下,仔猪饲粮添加FA的适宜剂量不同。正常免疫状态下,仔猪在断奶后0-7d、8-24d、25-31d和32-45d适宜的FA摄入量分别为1.4-1.5mg/d、2.9-3.0 mg/d、3.6-4.3 mg/d和0.44-0.55 mg/d。仔猪在LPS攻毒期间(0-7d)及其后继恢复过程中(8-14d和15-21d),适宜的FA摄入量分别为7.2 mg/d、6.7-7.2mg/d和4.0-4.5 mg/d。随着断奶仔猪的生长,日龄、体重和采食量增加,或免疫应激恢复期的延长,饲粮FA的添加水平应逐步下调。


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