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几种杜鹃组织培养技术研究

苗永美  
【摘要】:本研究分别以大树杜鹃(Rhododendron protisum var giganteum Forrest et Tagg)、桃叶杜鹃(R. anne Franch)和大萼杜鹃(R. megacalyx Balf.f.et Ward)的种子通过无菌发芽获得试管苗,然后选用试管苗的芽苗、叶片为中间繁殖体;银叶杜鹃(R.. argyrophyllum Franch)的茎段、茎尖离体培养已有成功报道,但叶片培养未成功,本试验只选用试管苗的叶片进行培养,通过正交试验设计、完全设计并结合方差分析、多重比较,筛选出了四种杜鹃不同器官离体培养的最佳培养基配方,探讨了不同基因型、基本培养基、TDZ、AC对几种杜鹃植株再生的影响,结果表明: (1)无菌发芽试验中,Read培养基中加入1.00mg/L的GA_3不仅能使大树杜鹃和桃叶杜鹃种子发芽时间提前,还能提高发芽率,一定程度上促进小苗的伸长生长。GA_3对大萼杜鹃的小苗生长不利,在不加GA_3的培养基上就能得到较高的发芽率及质量较好的苗子。 (2)6-BA对大树杜鹃有一定的毒害作用,TDZ对桃叶杜鹃的增殖能力及对大萼杜鹃愈伤组织的发生能力比6-BA、KT强。 (3)继代增殖试验中,通过增殖倍数、增殖芽苗率及平均株分化芽数对大树杜鹃和桃叶杜鹃的继代增殖进行考察,两种杜鹃的最合适的培养条件及结果分别是: 大树杜鹃:WPM+TDZ0.40mg/L+IBA0.05 mg/L,增殖倍数是3.25,增殖芽苗率达100%,平均每株分化2.25个芽;桃叶杜鹃:Read+TDZ0.30 mg/L+NAA0.05 mg/L,增殖倍数4.20,增殖芽苗率达100%,平均每株分化3.20个芽; 大萼杜鹃在Read或WPM并附加丁DZ0.20~0.40 mg/L+IBA或NAA0.01~0.10mg/L的培养基上,每个材料都产生了愈伤组织,但量较少。 (4)通过叶片愈伤组织诱导率和平均每块愈伤组织质量进行考察,三种杜鹃叶片愈伤组织诱导最佳培养基及结果分别是: 大树杜鹃:WPM+/DZ1.50mg/L+NAA0.10mg/L,诱导率为100%,平均每块质量是190.23mg;桃叶杜鹃:WPM+TDZ1.00mg/L+NAA0.20mg/L,诱导率为100%,平均每块质量是65.28mg;银叶杜鹃:Read或者WPM+TDZ1.00mg/L+IBA0.20~0.40mg/L,当在Read培养基上,IBA0.40 mg/L时即30号处理上,诱导率为67.50%,平均每块质量是39.35mg。 (5)桃叶杜鹃和银叶杜鹃的叶片不定芽的诱导的合适培养基、出芽率及平均每叶出芽数分别是: 桃叶杜鹃:WPM+FDZ1.50mg/L+IBA0.20mg/L即34号,出芽率77.50%,平均每叶出芽 数2.50;银叶杜鹃:Read+TDzl.00mg/L+I BAo.20mg/L,出芽率 75.00%,平均每叶出芽数400。 (6)桃叶杜鹃愈伤组织只发生增殖未再分化,大树杜鹃、银叶杜鹃及大粤杜鹃的愈伤组 织发生了再分化。 愈伤组织增殖的最佳培养基及结果分别是: 大树杜鹃:wpM+TDzl .00mg几+NAAo.05mg几即50号,质量增重1 .67倍: 桃叶杜鹃:WPM+TDZ2.00mg/L+NAAO.10mg/L即57号,质量增重 2.30倍; 银叶杜鹃:Read+TDZI .50mg/L+IBAO.10mg/L即70号,质量增重3.50倍。 愈伤组织再分化的最佳培养基及结果分别是: 大树杜鹃:WpM+TDZO.50 mg/L+NAAO.05 mg/L即49号,再分化率是20.00%,平均 每块分化3.50个芽;银叶杜鹃:Read+TDZI.somg几+IBAO.10mg/L,再分化率是40.00 %,平均每块分化5.00个芽;大曹杜鹃:Read+丁DZo.30 mg/L+NAAO.olmg,/L+ACo.20 %;本试验最佳处理即75号再分化率9000%,平均每块有22.50个芽。 (7)统计平均每株新展叶数及观察叶色变化,对壮苗培养基进行筛选,最佳壮苗培养基分 别是: 大树杜鹃:wpM+TDzo一0.lomg/L+IBAO.4omg几+Aeo.Zo%; Read+TDZO 10一0.20mg/L+N AAO.20mg几+A C0.20一0.40%。 桃叶杜鹃:Read十TDZo一0.lomg/L+ IBAo.4Omg几+ACO.Zo%; Read+TDZO.10一O.ZOm创L+NAAO.20mg/L十ACO.10%。 (8)通过生根率和平均根数进行考察,三种杜鹃的生根最佳培养基分别是: 大树杜鹃:Read或WPM+糖巧叭+IBAI.50m留L+NAAI.50mg/L十AC0.20%; 桃叶杜鹃:Read或WpM+糖15一309/L+IBAI.00m留L+NAAO.50mg/L+AC0.20%;大 尊杜鹃:Read或WPM+糖巧一309/L+IBAo.25 mg/L+NAAO.25 mg/L+AC0.20一0.60 %。


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