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绿色粘帚霉对柑桔绿霉(Penicillium digitatum)病的生物防治研究

李勇  
【摘要】:从柑橘园土壤中分离得到绿色粘帚霉(Gliocladium virens)菌株共36个。比较它们对柑橘绿霉菌(Penicillium digitatum)的拮抗性发现,G-26的拮抗性最强。利用紫外光诱变G-26后对诱变菌株进行筛选,获得对柑橘绿霉菌拮抗性最强的诱变菌株,UV-44,并对UV-44菌丝生长条件、分生孢子萌发条件、影响产孢、产抑菌物质的因素、发酵液的稳定性和抑菌谱、后代稳定性及对柑橘果实的室内防效等进行对了研究。 用紫外光处理G-26的分生孢子,在照射的前2min,孢子死亡率显著上升,3min达98.67%,5min则完全致死。结果表明,紫外光诱变G-26的最佳剂量为在15W紫外灯下30cm处照射3min。用该剂量对G-26进行诱变,在诱变获得的108个诱变株中,以UV-44对柑橘绿霉菌丝生长的抑制活性提高最多,以出发菌株G-26为对照,其相对抑制率为43.93%。 G-26和UV-44菌丝生长和产分生孢子的最适条件相同,为30℃、pH5和全黑暗。然而,它们的孢子萌发条件有所差异。UV-44较G-26菌丝生长速率下降,产孢能力降低。对影响UV-44产厚垣孢子因子的研究表明,各因子对厚垣孢子的产生有显著的影响,UV-44产厚垣孢子的最适培养基、温度、pH值和培养时间分别是30℃、pH10、燕麦片液体培养基和振荡培养13d。UV-44发酵液热稳定好,在80℃内随处理温度升高抑菌活性略有下降,121℃处理后抑制率仅下降16.71%;发酵液对酸碱较敏感,经酸碱处理后,不同pn值的发酵液抑菌活性差别显著,pH5的发酵液抑菌活性最强;作长时间放置后,发酵液抑菌活性不稳定,随着放置时间增长,抑菌活性显著下降,60d后其对柑柑橘绿霉菌的抑制率下降63.51%。测定UV-44发酵液的抑菌谱发现,UV-44对土传病害的抑制效果比对气传病害的好,对供试细菌几乎没有抑制作用。UV-44产抑菌物质的最佳培养时间为8d,最适温度和pH条件分别为为30℃和pH5。诱变菌株在PDA上连续转代7次,性状非常稳定。 室内贮藏实验的结果表明,贮藏30d、60d和90d后,各处理对绿霉病的发生均具有不同程度的抑制作用,分生孢子悬液的相对防效依次为83.98%、81.47%和67.54%,厚垣孢子悬液依次为29.99%、48.77%和52.80%,发酵原液依次为65.03%、61.12%和58.78%,但均不如对照药剂施保克。随着贮藏时间的增长,各处理的相对防效


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