天府系列花生内生细菌的分离及种群多样性研究

【摘要】：内生细菌是促进植物生长，提高植物抗病抗逆能力的有益微生物资源，广泛分布于各种植物体内。本研究通过调查目前四川省花生种植推广品种——天府系列的内生细菌资源，研究了花生内生细菌的种群组成及其分布规律，揭示了花生内生细菌的多样性及优势菌种分布，为促生抗病内生细菌的筛选和在可持续农业中的应用奠定基础。结果如下： 1．通过对花生内生细菌自然种群的分离鉴定，明确了芽孢杆菌属(Bucillus)为花生内生细菌的主要种群。利用平板稀释分离法，从四川省3个花生推广品种天府11号、12号、13号和对照岳易的不同生育期、不同部位中分离获得220株内生细菌。采用传统分类法共鉴定出17个属，包括芽孢杆菌属(Bacillus)、微球菌属(Micrococcus)、欧文氏菌属(Erwinia)、不动细菌属(Acinetobacter)、节杆菌属(Arthrobacter)、棒状杆菌属(Corynebacterium)、产碱菌属(Alcaligenes)、分枝杆菌属(Mycobacterium)、芽孢八叠球菌属(Sporosarcina)、肠杆菌属(Enterobacter)、黄杆菌属(Flavobacterium)、库特氏菌属(Kurthia)、假单胞菌属(Pseudomonas)、黄单胞菌属(Xantomonas)、变形菌属(Proteus)、慢生根瘤菌属(Bradyrhizobium)和链霉菌属(Streptomyces)。 Enterobacter、Flavobacterium、Kurthia、Pseudomonas、Xantomonas、Proteus分布最少，Bacillus、Micrococcus、Erwinia则为花生内生细菌的常见菌群，其中Bacillus是优势菌，数量最多，分布最广，鉴定出11个种，包括巨大芽孢杆菌(B．megaterium)、枯草芽孢杆菌(B．subtilis)、短小芽孢杆菌(B．pumilus)、地衣芽孢杆菌(B．licheniformis)、蜡质芽孢杆菌(B．cereus)、坚强芽孢杆菌(B．firmus)、凝结芽孢杆菌(B．coagulans)、球形芽孢杆菌(B．sphaericus)、蕈状芽孢杆菌(B．mycoides)、嗜热脂肪芽孢杆菌(B．stearothermophilus)、缓病芽孢杆菌(B．lentimorbus)。巨大芽孢杆菌是其中最优势的菌，是所有品种的常住菌群；枯草芽孢杆菌也在每个品种(至少有一个生育期)中都能分离到。非芽孢杆菌中，微球菌属是每个品种的常住菌群；欧文氏菌属能定殖在每个品种中。各品种芽孢杆菌的总数量在内生细菌总数量中所占的比例为：花期83.3％，收获期57.1％。 各品种不同生育期分离的内生细菌总数及其种群多样性有较大差异，但可以看出一个共同的规律：各品种苗期的内生细菌数目都为最高，苗期的种群多样性指数也都是处于最高或次高位置，除了天府12号的种子略高于苗期0.02之外，其余各品种苗期多样性指数远远高于其他生育期。 2．根据形态学观察判定，分离出的15株放线菌属于链霉菌属的6个类群5个亚群。每个花生品种中都有放线菌分布。叶是其分布最广的部位，茎中则最少。天府13号和岳易的种子中，也分别分离出3株放线菌。