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新月弯孢菌营养体亲和群研究

余霞  
【摘要】:新月弯孢菌是引起玉米弯孢菌叶斑病的优势病原菌。目前,玉米弯孢菌叶斑病在有些地区已构成严重威胁,成为玉米生产上的主要病害。鉴于该病害对玉米生产的重要影响,本研究采用硝酸盐营养缺陷型(nit)突变体互补测试法对来自全国11个省(市)39个地区的70株新月弯孢菌进行了营养体亲和性的测定和亲和群的划分,旨在弄清其营养体亲和性的测定方法和群体的营养体亲和群(VCG_S)多样性程度。 选用5个新月弯孢菌菌株分别接种在WAC、KPS、MMC、KNI、KAS 5种诱导培养基上,观察各菌株在培养基上受抑制和产生抗氯酸盐突变体的情况。结果表明,WAC培养基比其它培养基更能抑制新月弯孢菌菌株的生长,有利于产生抗氯酸盐突变体。经WAC诱导后,采用Czapek和MM鉴定得到4种nit突变体,即nit1、NitM、nit3和nitD,以nit1和nit3为主;用CDA鉴定只获得3种突变体,即nit1、NitM和nit3,以nit1和NitM为主,其中NitM所占的百分率远比另两种鉴定培养基上的高。结果表明,WAC-CDA组合培养基适宜用于新月弯孢菌nit突变体的筛选和鉴定。 选用WAC作诱导培养基,供试的70个新月弯孢菌菌株获得10197个抗KClO_3突变体,经CDA鉴定获得2207株,nit突变体,nit突变体频率为21.64%。在这些nit突变体中,nit1占63.30%,NitM占33.26%,nit3占3.44%。供试菌株全部获得了稳定的nit突变体,其中52个菌株获得了NitM突变体。 用各菌株的NitM作测试菌株,分别与自身和其它菌株的nit1或nit3进行互补配对。结果表明,同时获得互补nit突变体的51个菌株均为自身亲和性菌株。已有65个菌株被成功地划分为22个营养体亲和群(VCG_S),其余5个菌株因未获得NitM突变体暂时无法确定其营养体亲和群(VCG_S)。在划分出的22个VCGs中,有11个VCGs是由多菌株组成的,VCG_3为优势类群,含18个菌株,其地理来源最复杂,主要为致病性中等以上的菌株;其余11个VCGs内均仅有1个自身亲和菌株。以上结果初步表明,在新月弯孢菌群体内存在丰富的VCG多样性,VCG_3可能是与致病性相关的优势VCG,但未发现新月弯孢菌的营养体亲和性与菌株地理来源和致病性间的直接关系。


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