收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

鱼源嗜麦芽寡养单胞菌胞外蛋白酶的纯化与致病性研究

苏秀梅  
【摘要】: 近年来,斑点叉尾鮰一种急性流行性传染病频繁发生,初步诊断为由嗜麦芽寡养单胞菌引起的传染性套肠症。嗜麦芽寡养单胞菌致病因子的研究还未深入且少见报道。本试验从嗜麦芽寡养单胞菌胞外产物中提纯到一种胞外蛋白酶(ECPase),并对提纯的ECPase进行了致病性研究,以期搞清胞外蛋白酶是否是致病因子,其在致病中是否起重要作用,并为养殖生产中防治该病提供理论依据。 在胰酪胨大豆肉汤(TSB)培养基基础上,对体外培养嗜麦芽寡养单胞菌的胞外蛋白酶(ECPase)产生条件进行了优化。结果发现,其产量与碳源、氮源、培养时间、培养温度、培养基初始pH值有关。其优化产酶条件为:以蔗糖作为碳源,胰蛋白胨作为氮源,培养基初始pH值为7.0,在20℃下120r/min振荡培养72h,嗜麦芽寡养单胞菌可产生大量的ECPase。 在优化培养条件下,采用硫酸铵盐析、DEAE-Sephadex A50离子交换层析、SDS-PAGE等方法对嗜麦芽寡养单胞菌的胞外蛋白酶进行了分离纯化。结果表明嗜麦芽寡养单胞菌产生一种单一多肽,分子量为45.7Kda的胞外蛋白酶。 将倍比稀释的胞外蛋白酶与96孔板培养的Vero细胞一起培养,发现Vero细胞变性坏死,脱落,出现空斑;将ECPase腹腔注射小白鼠和斑点叉尾鮰,表现出很高的死亡率。其对小白鼠和斑点叉尾鮰的LD_(50)分别为4.33ug/g和3.49ug/g体重。接种小白鼠精神倦怠,排黏液便,剖解发现严重胃肠炎症状,肠道扩张,脾严重肿大、出血;光镜下可见肠粘膜上皮细胞坏死脱落,心肌细胞肿胀,严重颗粒变性,脾脏出血,大量红细胞浸润。死亡斑点叉尾鮰鳃丝肿胀,出现轻微肠炎,肝、脾、肾肿大等病变;肝细胞和肾小管上皮细胞变性坏死,脾出血,肝、脾、肾是ECPase作用的靶器官;超微病变也很明显,主要表现为多数组织器官的细胞核膜扩张,核染色质溶解消失,线粒体肿胀。虽未见临床上广泛出现的肠套叠现象,但肝、脾、肾的病变均与该菌自然感染发病的病变相似,表明嗜麦芽寡养单胞菌胞外蛋白酶是一种重要的致病因子。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 王庆奎;陈成勋;郭永军;白东清;乔之怡;刘志伟;丁莉莉;邢克智;;7种中草药对斑点叉尾鮰生理生化指标的影响[J];安徽农业科学;2011年15期
2 王硕文;;斑点叉尾鮰常见病害的防治[J];现代农业科技;2011年13期
3 黄可;杨雨虹;刘行彪;付熊;吴晗冰;;植酸酶预处理饲料对斑点叉尾鮰生长及磷利用率的影响[J];动物营养学报;2011年07期
4 鲁伦文;;溶氧对斑点叉尾鮰免疫机能及抗病力的影响[J];安徽农业科学;2011年21期
5 ;[J];;年期
6 ;[J];;年期
7 ;[J];;年期
8 ;[J];;年期
9 ;[J];;年期
10 ;[J];;年期
11 ;[J];;年期
12 ;[J];;年期
13 ;[J];;年期
14 ;[J];;年期
15 ;[J];;年期
16 ;[J];;年期
17 ;[J];;年期
18 ;[J];;年期
19 ;[J];;年期
20 ;[J];;年期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 匡刚桥;李萍;郑曙明;魏巍;;丁香酚对斑点叉尾鮰幼鱼的麻醉效果[A];第三届全国现代生态渔业管理与技术研究[C];2011年
2 麻韶霖;;斑点叉尾鮰肠道疾病发生原因调查与防治技术[A];中国南方十六省(市、区)水产学会渔业学术论坛第二十六次学术交流大会论文集(上册)[C];2010年
3 郑宗林;金立志;;专利植物提取物(好力高~)对斑点叉尾鮰生长性能的影响[A];水库养鱼技术问题与发展总集[C];2009年
4 郭清莲;;医院感染嗜麦芽寡养单胞菌的检出及耐药性分析[A];中华医学会第八次全国检验医学学术会议暨中华医学会检验分会成立30周年庆典大会资料汇编[C];2009年
5 陈愉;李军;李胜歧;卢岩;;嗜麦芽寡养单胞菌对氟喹诺酮类药物分子耐药机制的研究[A];中华医学会第七次全国呼吸病学术会议暨学习班论文汇编[C];2006年
6 陈建;程华;罗小红;胡君涛;;肠膜蛋白粉(DPS)替代鱼粉对斑点叉尾鮰回生长及消化酶的影响[A];渔业科技创新与发展方式转变——2011年中国水产学会学术年会论文摘要集[C];2011年
7 陈愉;李胜歧;褚云卓;王倩;;下呼吸道分离的嗜麦芽寡养单胞菌分子流行病学研究[A];中华医学会第七次全国呼吸病学术会议暨学习班论文汇编[C];2006年
8 陈愉;李胜歧;周玉珍;张智洁;孙继梅;孙博;;泵抑制剂对嗜麦芽寡养单胞菌氟喹诺酮主动外排表型特征的影响[A];中华医学会第七次全国呼吸病学术会议暨学习班论文汇编[C];2006年
9 江林源;杨学明;陈福艳;邓潜;黄光华;;斑点叉尾鮰的人工繁殖试验[A];广西水产研究所论文集(2001—2005)[C];2006年
10 刘建;王丽;;42株嗜麦芽寡养单胞菌的分布和耐药性分析[A];湖北省暨武汉市微生物学会分析微生物专业委员会第十届第五次学术会议论文汇编[C];2008年
中国博士学位论文全文数据库 前9条
1 黄小丽;斑点叉尾鮰源嗜麦芽寡养单胞菌胞外蛋白酶的性质及该菌检测方法的建立研究[D];四川农业大学;2007年
2 陈德芳;斑点叉尾鮰海豚链球菌病病原学、病理学和诊断方法研究[D];四川农业大学;2011年
3 刘玉林;斑点叉尾鮰病毒囊膜蛋白的鉴定及定位研究[D];华中农业大学;2012年
4 刘海英;斑点叉尾鮰(Channel catfish)鱼皮胶原蛋白及胶原蛋白多肽的研究[D];江南大学;2007年
5 陈愉;氟喹诺酮对嗜麦芽寡养单胞菌的防耐药变异浓度及其耐药机制[D];中国医科大学;2006年
6 耿毅;斑点叉尾鮰源嗜麦芽寡养单胞菌分离、鉴定与致病机理研究[D];四川农业大学;2006年
7 闫志勇;双齿围沙蚕消化道菌群的分析和生物活性物质的研究[D];青岛大学;2007年
8 艾晓辉;多西环素在斑点叉尾鮰中安全使用及快速检测技术研究[D];四川农业大学;2011年
9 赵兴华;苦马豆素降解菌分离、鉴定与特性研究[D];西北农林科技大学;2008年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 唐洪;斑点叉尾鮰嗜麦芽寡养单胞菌病间接ELISA检测法的研究[D];四川农业大学;2009年
2 苏秀梅;鱼源嗜麦芽寡养单胞菌胞外蛋白酶的纯化与致病性研究[D];四川农业大学;2007年
3 陈德芳;斑点叉尾鮰源嗜麦芽寡养单胞菌胞外产物活性与致病性研究[D];四川农业大学;2007年
4 丁伯文;斑点叉尾鮰消化道益生菌的筛选与应用研究[D];华中农业大学;2010年
5 熊华伟;亚硒酸钠胁迫下斑点叉尾鮰脑组织差异蛋白质组研究[D];南昌大学;2011年
6 倪俊;斑点叉尾鮰急性败血症病原学、病理形态学及其全菌灭活苗免疫效果研究[D];四川农业大学;2009年
7 范方玲;四川地区斑点叉尾鮰几种重要细菌性疾病病原检测及病原特性研究[D];四川农业大学;2010年
8 伊光辉;斑点叉尾鮰血清免疫球蛋白的提取纯化及部分特性分析[D];华中农业大学;2001年
9 何宝荣;亚硒酸钠对斑点叉尾鮰的急性毒性研究[D];南昌大学;2010年
10 李敏;斑点叉尾鮰NLR家族几个免疫相关基因的表达分析及染色体定位[D];中国海洋大学;2012年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 江苏省淡水水产研究所研究员 徐在宽;斑点叉尾鮰[N];江苏农业科技报;2002年
2 全国水产技术推广总站  周国平;斑点叉尾鮰产业渐成规模[N];中国渔业报;2005年
3 记者 赵欢 通讯员 张耀华 何斌;我州斑点叉尾鮰网箱养殖技术推广喜获丰收[N];团结报;2009年
4 钟水;斑点叉尾鮰养殖回暖 一苗难求[N];中国渔业报;2011年
5 本报记者 张尚武 通讯员 王敏;一条鱼的“江湖”[N];湖南日报;2011年
6 张霞;冬季池塘养殖斑点叉尾鮰[N];中国渔业报;2008年
7 江苏省水产技术推广站 张永江;池塘主养斑点叉尾鮰[N];江苏农业科技报;2002年
8 记者 朱建军 通讯员 战晓晓;福州食企成功解除美国“自动扣留”[N];中国食品报;2009年
9 李惠;今年水产养殖品种的市场走势[N];中国特产报;2005年
10 吴江;斑点叉尾鮰烂尾病的防治[N];江苏农业科技报;2005年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978