收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

多重PCR方法研究儿童呼吸道感染病毒谱系特征

张国翠  
【摘要】:目的: 建立一种可以检测多种病毒的、快速、高敏感度和高特异度的呼吸道病毒检测方法,本研究以呼吸道感染的儿童为研究对象,使用Seeplex多重RT-PCR和VRDAL多重巢氏PCR两种方法检测呼吸道病毒感染标本,并比较其结果,以更合适的检测方法全面的反映上海地区0-3岁儿童中病毒谱系的真实分布情况,揭示各种病毒感染的排序位次和占比。 方法: 征集上海地区2009年5月到2010年7月新华医院儿科呼吸道发热门诊0~3岁组患儿164例,以咽拭子对呼吸道分泌物采样,提取样本中病毒核酸,反转录合成cDNA。先使用VRDAL多重巢氏PCR方法扩增8种呼吸道病毒的目的基因,以琼脂糖凝胶电泳检测特异性产物条带,判定感染病毒。然后使用Seeplex(?) RV15 ACE Detection kit扩增15种呼吸道病毒的目的基因,经电泳后判定感染病毒,并比较两种多重PCR的结果,分析上海地区0-3岁组儿童呼吸道病毒感染的谱系特征,明确其优势病原,病毒检出与季节、年龄、性别等的关系。 结果: 1.经实验证实Seeplex多重RT-PCR能特异性扩增15种呼吸道病毒的目的基因,灵敏度高,稳定可靠。 2. 2009-2010年上海地区0-3岁组儿童呼吸道病毒感染经Seeplex多重RT-PCR方法检测,病毒检出率为78.7%,多重感染率29.9%,前三位的优势病原是hRV、IVA、PIV-2。 结论: 1.两种多重PCR方法相比,Seeplex多重RT-PCR在病毒检出率和多重感染方面明显优于VRDAL多重巢氏PCR,可广泛应用于临床和科研实验室。 2.本实验Seeplex多重RT-PCR方法成功研究儿童呼吸道感染病毒谱系特征为研究和开发微生物高通量检测方法奠定基础。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 许万宏,姚炳华,曾文前,李永培,李淑萍,宗改兰;用PCR技术检测喘息性疾病患儿肺炎支原体的研究[J];中国优生与遗传杂志;1998年05期
2 郑荣涛,邱勇,李中伟,杜文莉,侯建玲,周盛基;性病门诊就诊人群沙眼衣原体感染及相关危险因素研究[J];中国麻风皮肤病杂志;2002年04期
3 邓少丽,罗阳;荧光定量PCR技术及其在临床上的应用[J];国外医学.临床生物化学与检验学分册;2002年05期
4 和振坤;血清乙型肝炎病毒核酸定量与肝损伤及干扰素应答的关系[J];第三军医大学学报;2004年05期
5 唐浏英,邱海燕,李元凯,张伟,尚德秋,胡德育,张福利,刘冬立,李巧林,王进,李秋芬;多聚酶链反应用于布鲁氏菌病病人诊断的流行病学评价[J];中华流行病学杂志;1997年03期
6 刘明团,王树声,朱田风,韦一知;PCR系统制备地高辛标记的探针检测脊髓灰质炎病毒核酸[J];中华流行病学杂志;1997年03期
7 郭晋海,邵锡如;PCR检测HBV-DNA及其临床意义探讨[J];青海医学院学报;1997年01期
8 翁炳焕;PCR法检测血清胃癌相关抗原[J];陕西医学检验;1997年03期
9 曹孟德,秦东春,郭小兵,苏堤,王东升,苏天水,燕桂香;HLA-DR快速基因分型PCR-SSP方法的建立[J];河南医科大学学报;1999年01期
10 王宁霞,李扬秋,蒋光愉,徐以浩;PCR技术检测大肠肿瘤及肿瘤样病变中EB病毒DNA[J];广东医学;1999年03期
11 耿志华,祝扬,罗畅民,邓松华;用SRID法检测结核性胸水中活动性结核标记物的意义[J];疾病控制杂志;1999年02期
12 赵庆萱,董勇前,陈翠萍;普通Taq DNA聚合酶扩增幽门螺杆菌尿素酶基因长片段[J];微生物学免疫学进展;1999年02期
13 郭金虎,余多慰,赵清良,张晓琼,李华,单祥年;应用显微操作和PCR技术进行基因的染色体定位[J];动物学杂志;2000年04期
14 吴爱军,王红,俞守义;在多基因PCR中对dNTP与Mg~(2+)的浓度关系的研究[J];中国公共卫生;2001年02期
15 赵玉千,郝珊,付耀文,吴长利;膀胱癌多重耐药基因表达的研究[J];吉林大学学报(医学版);2002年01期
16 翁梁,刘丹,姚为民,盛君;PCR方法在水蛭素基因克隆方面的新应用[J];中国生化药物杂志;2002年02期
17 李军;PCR技术在中医药研究中的应用[J];现代中医药;2002年01期
18 霍满鹏,蒲阿利,高成英;延安市179例性传播疾病测试分析[J];延安大学学报(自然科学版);2002年01期
19 张宏伟,徐永俊,张丽霞,丁鹏,陈嵘;小鼠ScFv基因片段的构建[J];中国公共卫生;2003年05期
20 龙腾,王蔚,蔡庆,刘俊峰;PCR检测产毒性大肠杆菌及初步应用[J];第四军医大学吉林军医学院学报;1995年03期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 谭诗文;余波;冉懋韬;蔡一鸣;艾玉萍;王璇;张华;;牛源HBV套式PCR方法建立及其S靶基因同源性分析[A];中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第八次学术研讨会论文集[C];2010年
2 王平;王辉;许文兵;朱元珏;;肺组织结核分枝杆菌巢式PCR快速检测[A];中华医学会呼吸病学年会——2011(第十二次全国呼吸病学学术会议)论文汇编[C];2011年
3 回文广;赵廷昌;孙福在;张卉;王建荣;高孝强;田丽;;实时荧光定量PCR原理及其应用[A];中国植物病理学会第六届青年学术研讨会论文集——植物病理学研究进展(第五卷)[C];2003年
4 张太翔;凌宗帅;徐彪;梁成珠;朱来华;孙军;王洪兵;;实时荧光定量PCR检测猪流感病毒方法的建立[A];动物检疫学分会2010年学术年会论文集[C];2010年
5 吴驰;张红梅;詹能勇;邓永聪;单万水;余卫业;;荧光定量PCR技术在肺结核诊断中的临床应用研究[A];2010年中国防痨协会临床/基础专业学术大会汇编[C];2010年
6 周素娟;张铁军;何纳;;HCV的C/E1区PCR扩增方法的改进[A];华东地区第十次流行病学学术会议暨华东地区流行病学学术会议20周年庆典论文集[C];2010年
7 李青;钟青萍;王丽;;海产品中副溶血弧菌的PCR快速检测方法的建立[A];“食品加工与安全”学术研讨会暨2010年广东省食品学会年会论文集[C];2010年
8 陈信忠;任聪;龚艳清;王寿昆;;实时荧光定量PCR法检测对虾白斑综合征病毒[A];经济发展方式转变与自主创新——第十二届中国科学技术协会年会(第三卷)[C];2010年
9 潘康成;冯兴;崔恒敏;张亚兰;赵爽;;实时荧光定量PCR检测鸡口服枯草芽孢杆菌后肠道芽孢杆菌数量变化[A];第四届第十次全国学术研讨会暨动物微生态企业发展战略论坛论文集(下册)[C];2010年
10 孙秋影;卢长春;魏强;庞淑芬;;LightCycler 480实时荧光定量PCR仪在献血者血液筛查中的应用[A];中国输血协会第五届输血大会论文专集(摘要篇)[C];2010年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 张在平;荧光定量PCR检测禽白血病病毒与RNA干扰抑制J亚群禽白血病病毒复制的研究[D];内蒙古农业大学;2010年
2 渠柏艳;基于血液样品和微流控芯片技术的细胞分离、PCR扩增及DNA测序方法研究[D];东北大学;2009年
3 张丽;实时定量PCR检测儿童急性早幼粒细胞白血病PML/RARα融合基因[D];北京协和医学院;2011年
4 李泽松;缺失型α-地中海贫血基因诊断芯片及在分子流行病学研究中的应用[D];重庆大学;2008年
5 陈智勇;胰腺癌相关基因mucin4的初步研究[D];第二军医大学;2005年
6 王彦君;细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4基因微卫星多态性与炎症性肠病相关性研究[D];吉林大学;2008年
7 马孟根;猪源致病性沙门氏菌耐药基因PCR和基因芯片检测技术研究[D];四川大学;2005年
8 肖性龙;多重荧光PCR与液相芯片高通量病原体检测体系的建立与应用[D];华南理工大学;2010年
9 陈寒玉;多氯联苯类环境激素的实时定量免疫PCR检测方法研究[D];东华大学;2009年
10 张云霞;基于纳升级液滴阵列的实时定量RT-PCR系统的研究及其在单细胞中MicroRNA定量检测中的应用[D];浙江大学;2013年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 王稳;利用RT-PCR验证基于小鼠外显子芯片发现的脑缺血相关基因表达的研究[D];西北农林科技大学;2010年
2 刘新军;表达布氏杆菌sodc基因的重组沙门氏菌的构建及不同种布氏杆菌鉴别PCR检测方法的建立[D];华中农业大学;2010年
3 郭世奎;实时荧光定量PCR技术对结直肠癌患者肠道微生态的研究[D];昆明医学院;2011年
4 金戈;博尔纳病病毒磷蛋白的原核表达和p24片段荧光定量PCR试剂盒的研制开发[D];重庆医科大学;2011年
5 刘志国;实时多重荧光PCR快速鉴别布鲁菌方法的建立[D];内蒙古农业大学;2010年
6 郑升博;猪链球菌多重PCR检测方法的建立及屠宰场样品感染率的调查研究[D];上海交通大学;2010年
7 刘宁;PCR扩增16srRNA基因以快速诊断败血症及分型细菌[D];南昌大学;2010年
8 陈晶晶;不同纳米材料对PCR优化作用的研究及机制探讨[D];东华大学;2011年
9 谭景尹;PCR—膜芯片~(?)技术检测结核杆菌耐药基因突变的应用研究[D];广西医科大学;2011年
10 王文娟;食源性致病菌多重PCR检测试剂盒的研制与应用[D];山东农业大学;2011年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 通文;Bio—Rad公司推出快速定量PCR反应液[N];中国医药报;2008年
2 通言;ABI实时定量PCR仪获准与rRT—PCR Flu Panel联用[N];中国医药报;2008年
3 本报记者 黄薇;治疗儿童呼吸道感染把握三点[N];健康报;2010年
4 阿良;免疫调节剂 有效治疗儿童呼吸道感染[N];医药经济报;2003年
5 郭伟立;实时、个体、高效[N];中国医药报;2011年
6 本报记者 谭勇 赖强(实习);黄漫翔:接盘2亿漂亮厂房之后[N];医药经济报;2004年
7 记者 瞿剑;猪是否“感冒”五小时见分晓[N];科技日报;2009年
8 《金周刊》记者 朱杰;罗氏为何青睐深圳匹基[N];中国经营报;2001年
9 《金周刊》记者 朱杰 新华社记者 王璐;记者调查广州达安造假内幕[N];中国经营报;2001年
10 记者 张平阳 杨斌鹄;快速检测甲流 西安批量生产关键设备[N];西安日报;2009年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978