碳水化合物反应元件结合蛋白及其靶基因在非酒精性脂肪肝发病机制中的作用

【摘要】：目的 以高糖饮食构建大鼠非酒精性脂肪肝(NAFLD)模型,通过对不同时间点大鼠肝组织中ChREBP及其靶基因ACC﹑ FAS的mRNA表达和蛋白水平,ChREBP与ACC﹑ FAS基因启动子碳水化合物应答元件(ChRE)结合情况的检测,以探讨ChREBP及其靶基因ACC﹑ FAS在高糖大鼠非酒精性脂肪肝(NAFLD)发病机制中的作用。 方法 选取SD大鼠32只,随机分为对照组和高糖组。高糖组于4、8、12周末处死,对照组于12周末处死。每组在处死前禁食12小时后腹主动脉采血检测甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST),HE染色观察肝脏脂肪变性,RT-PCR和Western blot方法测定不同时间点大鼠肝脏组织中ChREBP、ACC、Fan的mRNA表达和蛋白水平,染色质免疫共沉淀的方法分析不同时间点ChREBP与ACC﹑ FAS基因启动子碳水化合物应答元件(ChRE)结合情况。 结果 成功构建高糖饮食大鼠NAFLD模型,随着造模时间的延长,血清生化(TG、、TC、ALT、AST)指标显著升高(P0.01),肝脂肪程度不断加重,第4、8和12周末高糖组大鼠肝组织ChREBP、ACC、Fan mRNA、蛋白及ChREDNA的表达水平,与对照组差异显著(P0.01),且随造模时间延长,其表达量显著增加。 结论 高碳水化合物饮食可增强ChREBP的表达,而ChREBP通过上调ACC﹑ FAS的表达参与了非酒精性脂肪肝的形成过程。因此ChREBP可能是高糖饮食导致的非酒精性脂肪肝的重要致病因子,ChREBP有可能成为治疗非酒精性脂肪肝的新作用靶点。