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染料木黄酮对大鼠肺动脉高压的作用及机制研究

张玉坤  
【摘要】:目的肺动脉高压是一种临床常见病,以肺循环阻力升高引起肺血管重构为特征,其发病机制至今尚未完全阐明,其治疗仍以延缓病情进展为主,因此对肺动脉高压的研究具有非常重要意义。本实验采用野百合碱腹腔注射建立肺动脉高压大鼠模型和采用自体血栓二次栓塞肺动脉建立慢性栓塞性肺动脉高压大鼠模型,观察染料木黄酮对这两种模型大鼠肺动脉压、肺血管重构、右心室肥厚及肺组织相关蛋白表达的影响,研究染料木黄酮对大鼠肺动脉高压的作用及机制,为其治疗肺动脉高压提供实验依据。 方法1.建立肺动脉高压大鼠模型。雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠,(1)60只,按60mg/kg剂量单次腹腔注射野百合碱,将造模组大鼠分为野百合碱组及高低不同剂量的染料木黄酮治疗组。另设正常大鼠为对照组,大鼠按60mg/kg剂量单次腹腔注射生理盐水。所有组大鼠饲养4周;(2)60只,经颈外静脉回输体外制备的自体血栓栓子,2周后同法进行二次栓塞,并全程腹腔注射抗纤维溶解剂氨甲环酸建立大鼠栓塞后肺动脉高压模型。将造模组大鼠分为栓塞4周组、栓塞4周后染料木黄酮治疗组及栓塞8周组,另设正常大鼠为对照组。栓塞4周组大鼠饲养4周,其它组饲养8周。 2.检测各组大鼠平均肺动脉压(mPAP)、右心肥厚指数(RVHI)、光镜及电镜下观察肺血管结构改变,免疫印迹及免疫组化检测肺组织相关蛋白的表达。 结果野百合碱模型:通过腹腔单次注射野百合碱的方法成功建立了大鼠肺动脉高压模型;野百合碱组较正常对照组大鼠肺小动脉平滑肌明显增生肥大,而染料木黄酮治疗组大鼠肺小动脉平滑肌增生肥大较野百合碱组有改善;染料木黄酮治疗组较野百合碱组大鼠平均肺动脉压降低(P0.01),右心肥厚指数下调(P0.01),尤以大剂量染料木黄酮治疗组明显(P0.01);染料木黄酮治疗组大鼠较野百合碱组大鼠肺组织血红素氧合酶-1表达明显上调(P0.01),尤以大剂量染料木黄酮治疗组明显(P0.01)。 栓塞模型:通过自体血栓二次回输的方法建立了大鼠肺动脉高压的模型,13只因急性肺栓塞而死亡;与正常对照组大鼠相比,染料木黄酮治疗组及栓塞8周组大鼠肺小动脉中层平滑肌细胞增生肥大,而栓塞4周组大鼠肺小动脉无明显重构;与正常对照组及栓塞4周组大鼠相比,染料木黄酮治疗组及栓塞8周组大鼠平均肺动脉压及右心肥厚指数明显升高(P均0.01);染料木黄酮治疗组及栓塞8周组较正常对照组及栓塞4周大鼠肺组织eNOS明显下降(P均0.01);染料木黄酮治疗组较栓塞8周组大鼠肺组织eNOS明显升高(P0.01)。 结论染料木黄酮能改善肺动脉高压大鼠的肺动脉平均压及右心肥厚,并上调其肺组织相关蛋白的表达,提示其发挥对肺动脉高压的保护作用过程中可能有上述蛋白的参与。


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