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CUMS模型大鼠前额叶蛋白质组学研究

房亮  
【摘要】:研究背景: 抑郁症是一种常见的精神疾病。目前抑郁症已成为全球范围内重大公共卫生问题之一,其致残率、致死率高,给患者、家庭和社会带来了沉重的负担,但其发病机制不清。研究显示前额叶功能异常是抑郁症脑结构、功能改变的现象之一。抑郁症患者尸脑研究提示:广泛额叶背侧区、扣带前回膝下部皮质变薄,神经元体积缩小,神经胶质细胞丢失。 目的: 本研究运用蛋白质组学技术研究慢性不可预见性温和刺激CUMS(Chronic unpredictable mild stress)模型大鼠前额叶分子水平变化,进一步探讨抑郁症疾病状态下可能的分子机制,为抑郁症的诊断和治疗提供新的思路。 方法: 选取18只健康成年SD (Sprague-Dawley)大鼠随机分为CUMS组和正常组,对CUMS组大鼠进行28天的慢性刺激后对两个组的大鼠进行行为学评价。每组随机选取3只大鼠前额叶进行双向凝胶电泳,对差异点用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALD-TOF/TOF)进行差异点蛋白鉴定,对差异表达蛋白进行生物信息学分析。另外选取12只SD大鼠(6只/组),在前额叶中对差异蛋白用进行Western blot(WB)方法验证。 结果: 1、CUMS组大鼠与正常组大鼠在行为学比较中均有统计学差异,说明模型大鼠模型构建成功。2、运用双向电泳技术发现模型大鼠前额叶有60个蛋白点表达有差异,最终鉴定出31个蛋白质。3、运用生物信息学对差异蛋白进行分析,结果显示这些蛋白主要与凋亡、神经发生、能量代谢相关4、WB结果显示,抑郁组二氢嘧啶酶相关蛋白较正常组明显增多(t=4.094,P=0.002),与双向电泳结果一致;此外,乳酰谷胱甘肽裂合酶在抑郁组中的表达较正常组明显增多(t=2.965,P=0.014),与双向电泳结果一致。膜联蛋白A3在两组间比较没有统计学差异(t=0.169,P=0.869)。 结论: 1、慢性应激可以导致大鼠前额叶凋亡及神经发生相关蛋白的改变,提示这些蛋白与疾病状态下前额叶病理生理改变密切相关。 2、前额叶中差异表达的二氢嘧啶酶相关蛋白和乳酰谷胱甘肽裂合酶可能在疾病发生时发挥了重要作用。


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