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1,25-二羟维生素D_3对人胃癌细胞体外增殖和TNF-α表达的影响

张莉  
【摘要】:背景与目的: 1,25-二羟维生素D_3(1,25-dihydroxy-vitamin D_3,1,25(OH)_2D_3)是维生素D最主要的活性形式,分子式为C27H44O,分子量为384.6377,主要促进肠内钙磷的吸收和沉积,目前多用于治疗佝偻病及骨质软化病,但其除了对钙磷代谢的影响外还对乳腺癌、肺癌、前列腺癌等多种癌细胞具有抗肿瘤作用。维生素D受体(VDR)介导1,25(OH)_2D_3的抗癌作用,VDR广泛分布于包括胃在内的多种组织中,故1,25(OH)_2D_3对人胃癌细胞增殖可能有抑制作用,但目前相关研究较少且仍存争议。本研究用1,25(OH)_2D_3干预人胃癌SGC-7901细胞,并观察胃癌细胞的增殖及肿瘤细胞坏死因子α(TNF-α)mRNA及蛋白的表达,探讨在胃癌化疗中维生素D的应用前景及可能机制。 方法: 1.体外培养胃癌SGC-7901细胞。 2.应用MTT法观察不同浓度和干预时间下1,25(OH)_2D_3对胃癌SGC-7901细胞增殖的抑制情况。 3.应用FCM法分析不同浓度1,25(OH)_2D_3对人胃癌SGC-7901细胞周期的影响。 4.应用real time RT-PCR法观察1,25(OH)_2D_3干预下胃癌SGC-7901细胞TNF-αmRNA的转录情况。 5.应用Western blot法检测人胃癌SGC-7901细胞TNF-α蛋白的表达情况。 结果: 体外实验发现:1,25(OH)_2D_3对胃癌SGC-7901细胞增殖有抑制作用(P<0.05),其抑制增殖活性的效应随着药物作用时间和摩尔浓度的增加而呈现逐渐增强的特点,即具有时间剂量依赖性。经1,25(OH)_2D_3处理72h后细胞周期出现向G0/G1期移行的动力学改变(F=9.81,P<0.05)。经1,25(OH)_2D_3处理72h后可使胃癌SGC-7901细胞TNF-α mRNA转录及蛋白表达水平均减少,其效应随着药物作用时间和摩尔浓度的增加而呈现逐渐减少的特点,即具有剂量依赖性(P<0.05)。 结论: 1,25(OH)_2D_3能显著抑制胃癌SGC-7901细胞的增殖,诱导细胞出现G0/G1阻滞,并在基因转录水平对TNF-α基因产生抑制作用从而降低了TNF-α蛋白表达。提示1,25(OH)_2D_3抑制胃癌细胞增殖可能与胃癌细胞内TNF-α的表达减少相关。


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