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1.人参皂苷Rg1对衰老大鼠胸腺结构与功能的影响 2.人参皂苷Rg1联合阿糖胞苷对白血病细胞KG1α凋亡的影响

贾道勇  
【摘要】:目的免疫系统衰退是机体衰老的重要表现,也是衰老生物学研究的重要课题。胸腺是人体重要的中枢免疫器官,是T细胞发生与成熟场所,也是机体衰老发生最早最明显的免疫器官,如何延缓胸腺衰老值得高度重视。人参是中医临床“补气”要药,有几千年的临床应用历史。现代医学研究证明,人参具有延缓衰老、调节免疫、抗肿瘤、神经保护等作用。本课题组既往研究证明,人参皂苷Rgl既能够延缓造血干/祖细胞的衰老,并可以诱导白血病K562细胞株的衰老,说明人参有“双向调控”或“扶正祛邪”作用。人参皂苷Rgl是否能够延缓免疫器官衰老,还尚未见报道。本实验通过构建D-半乳糖制大鼠衰老模型,研究人参皂苷Rg1对衰老大鼠胸腺结构与功能的影响,旨在阐释人参皂菅Rg1延缓免疫器官衰老的机理,为天然药物有效成分延缓机体衰老提供新的思路和方法。方法将大鼠随机分为四组;衰老模型组(D),皮下注射D-gal(120mg/Kg/d)qd×42;(2)I崦1衰老模型组(DR),注射D-gal时间与剂量同衰老模型组,第15d起腹腔注射Rg1 (20mg/Kg/d) qd×28;(3)正常对照组(C),注射等时等剂量的生理盐水; (4)Rg1对照组(R),注射等剂量的生理盐水(qd×14),第15d起腹腔注射Rg1 (同Rg1衰老模型组)。模型复制和给药注射完成24h,取胸腺观察组织形态学,计算胸腺皮/髓质比例,冰冻切片SA-β-Gal染色分析胸腺细胞衰老,免疫组化及免疫荧光分析胸腺组织内细胞因子表达情况, CCK-8法及CFSE流式细胞术检测大鼠胸腺细胞对刀豆蛋白(Con A)反应增殖能力,流式细胞术分析细胞周期及凋亡,ELISA检测细胞因子的含量,Western blotting检测胸腺组织衰老相关蛋白P53,P21,Rb的表达。结果1 D-半乳糖能够显著提高胸腺细胞SA-β-Gal染色阳性率、凋亡比例及G0/Gl期比例,降低其对刀豆蛋白A的增殖反应能力、胸腺皮/髓质比例、胸腺指数及细胞因子的分泌量,使衰老相关蛋白的表达明显增加。2人参皂苷Rgl能够明显降低D-半乳糖致衰老大鼠胸腺细胞的凋亡率及SA-β-Gal染色阳性率,增加细胞周期S期的比例,提高衰老大鼠胸腺细胞对刀豆蛋白A的增殖反应能力,胸腺皮/髓质比例与胸腺指数,使细胞因子的分泌量显著提高,并能明显降低其衰老相关蛋白的表达。结论1 D-半乳糖能够诱导大鼠衰老,并诱导胸腺形态与功能衰退。2人参皂苷Rgl能拮抗D-半乳糖诱导的大鼠胸腺衰退,提高胸腺细胞功能,其机制可能与降低衰老相关蛋白的表达有关。


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