收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

小鼠囊胚体外侵袭肿瘤细胞现象的初步解析

后晓南  
【摘要】: 从发生学角度来看,肿瘤与早期胚胎在细胞的增殖、生长和分化等方面都有许多共同特点,其中早期胚胎的着床植入在形成对母体的侵袭后,囊胚迅速增殖,创建独立的血供,从母体获得营养、壮大自身的体积,就象一个恶性的肿瘤细胞在肆虐机体,唯一不同的是事件发展的结果:一个是可控的生理阶段,另一个则是不可控的病理过程。因此两者侵袭机体生物学行为上的可参照性,使得肿瘤侵袭与囊胚植入的相似性研究可以作为研究生命起源、胚胎着床与肿瘤侵袭与转移的突破口。 近年来胚胎与肿瘤细胞的比较性研究已大大的促进了两门学科的发展,但是单纯对立两种生命现象进行两类不同细胞行为的比较性研究还不能解释实质性问题,只有将两种细胞形式--两种生命形式放在同一环境中,统一对立地研究相互影响相互作用后所表现的整体生物学行为的变化,从中找到可能的内在规律,才能指导科研实践。在进行胚胎干细胞的获取与培养的实验研究中,都发现这样一种现象,即将脱带后的 WP=6 小鼠囊胚放在饲养层细胞上培养时(如原代小鼠、人的子宫上皮细胞,原代小鼠胚胎成纤维细胞及STO细胞),在培养的第三天,小鼠囊胚滋养层巨细胞充分扩展并可以推开饲养层细胞直接在培养物表面生长形成一胚盘样结构。就是这种能够推开底层细胞并生长的行为,使人容易想到肿瘤细胞在侵犯周围组织时所表现出来的进攻性,那么作为都具有侵袭特征的两种类型的细胞,在共处于同一培养环境时,对环境的反应性及相互反应将会发生什么样的变化呢? 据此,本课题在建立体外共培养体系的基础上,对胚胎与肿瘤细胞相互作用的生物学行为进行了观察与研究。拟从共培养对象改变的角度来建立新的思维方式,并试图最终从宏观整体来解读生命的多样性。本实验建立在囊胚体外着床模型的基础上,同样应用的是共培养体系,但在本共培养体系中我们应用生长旺盛的未经过有丝分裂抑制剂处理的肿瘤细胞作为囊胚的共培养细胞,我们没有对肿瘤细胞进行任何处理,任其在优越的生长环境中生长,因此也使我们能够从肿瘤细胞生长的角度观察囊胚对肿瘤细胞的侵袭及其自身的生长变化情况。 本实验的目的不只是在于建立共培养体系,而更重要的在于我们试图通过这种共培养实验可以认识到小鼠囊胚生物学行为的高级性,并通过认识这种特殊的高级性,我们想要达到一个全新审视定义生命所蕴藏的能力的最终目的。 WP=7 目的: 1. 建立小鼠囊胚与肿瘤细胞共培养体系,证明小鼠囊胚在肿瘤细胞上贴附与扩展的可能性。 2.了解囊胚着床部位肿瘤细胞的生物学行为, 从全新的视角观察比较小鼠囊胚与肿瘤细胞相互作用时生物学行为的变化,解释胚胎与肿瘤细胞之间的联系, 并探讨发生变化的可能机制。 意义: 1. 可以提供一个体外正常组织侵袭肿瘤细胞的极简明的模型,表明囊胚生物学本质的高级性。 2. 研究的结果一方面可以补充细胞间相互作用的理论,另一方面可能补充胚胎着床和肿瘤发生的机制,从而进一步促进两门学科的交叉、渗透与发展,对生物学基础理论的研究具有重要意义及其应用前景。 内容: 1. 小鼠囊胚体外侵袭肿瘤细胞群的行为观察。 2. 小鼠囊胚在正常细胞群上的生长行为。 3. 共培养体系中,肿瘤细胞群与正常细胞群对小鼠囊胚黏附扩展能力影响的比较性研究。 4. 研究在共培养体系中局部肿瘤细胞对小鼠囊胚侵袭行为的反应。 5. 探讨人纤维蛋白凝胶作为小鼠囊胚体外三维培养的支持物,建立简明的小鼠囊胚体外侵袭三维模型的可能性。 WP=8 结果: 一 、小鼠囊胚侵袭肿瘤细胞的生长行为 将妊娠第四天的小鼠囊胚与不同来源的肿瘤细胞及正常细胞株进行体外二维共培养,(共培养的细胞包括人肺癌细胞株A549、人低分化卵巢黏液性癌细胞株3AO、人低分化卵巢浆液性囊腺癌细胞株HO-8910、人卵巢癌细胞株SKOV3、人宫颈癌细胞株Hela、人肾癌细胞株GRC-1、人膀胱移行细胞癌细胞株T24、人成骨肉瘤细胞株MG-63、人脐静脉内皮细胞株ECV-304、小鼠黑色素细胞株B16、小鼠成纤维细胞株PA317、新生鼠肺成纤维细胞原代MF1、仓鼠卵巢上皮细胞株CHO、兔成骨细胞原代培养的冻存细胞RF10代),结果发现小鼠囊胚在单层生长的肿瘤细胞及正常细胞上可以形成晚期囊胚,进而正常脱带,脱带后的小鼠囊胚可以顺利的贴附在未进行处理的单层贴壁式生长的肿瘤细胞群及正常细胞群的上表面,并在继续培养过程中出现滋养层巨细胞的进一步扩展形成胚盘样区域,与其在正常饲养层细胞上的生长行为相似,而正常增殖的肿瘤细胞不会再生长在滋养层巨细胞的上面,而是在滋养层巨细胞的外围形成肿瘤细胞的重叠生长, 与小鼠囊胚扩展出来的滋养层巨细胞有明显的界限。 二、小鼠囊胚体外侵袭肿瘤细胞与正常细胞的比较性研究 初步实验结果表明小鼠囊胚在体外对底物细胞的贴附与扩展行为的发生无种属特异性,而且与相作用的细胞的分化水平可能无关, 其中除 WP=9 了共培养细胞对小鼠囊胚36小时扩展能力的影响没有显著性差异,P值大于0.05外, 共培养细胞对小鼠囊胚体外黏附扩展能力都具有一定的影响,共培养细胞之间具有显著性差异,P值均小于0.001。但是这种影响与共培


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前18条
1 常秀峰,张建平,余裕炉;囊胚培养与移植[J];国外医学(计划生育分册);2004年04期
2 宋文妍;;超高速玻璃化冷冻人类囊胚获得妊娠成功[J];国外医学(计划生育/生殖健康分册);2006年01期
3 孙海翔,顾惠心,佘宏;应用序列培养系统培养鼠囊胚的效果观察[J];中国实验动物学杂志;2000年04期
4 张永苗,张宁媛;囊胚培养与囊胚移植的研究进展[J];中华男科学;2001年04期
5 Yakin K. ,Balaban B. ,Urman B. ,朱国栋;一个或多个多核胚叶的出现对胚胎向囊胚期发育潜力的影响[J];世界核心医学期刊文摘(妇产科学分册);2005年06期
6 方明珠;谭丽;马丽影;;应用冷冻环玻璃化冷冻小鼠囊胚的效果观察[J];生殖医学杂志;2006年06期
7 石运芝;刘凯;杜辉;;囊胚期小鼠胚胎体外培养条件的研究[J];泰山医学院学报;2006年05期
8 付敏;李永刚;李蓉;章晓梅;;玻璃化冻融小鼠囊胚的超微结构观察[J];生殖医学杂志;2007年05期
9 熊彦娥;张端莲;吴秀卿;;维生素A酸对小鼠囊胚细胞凋亡的影响[J];数理医药学杂志;2007年03期
10 周黎明;;囊胚培养及移植在体外受精过程中的临床应用[J];现代实用医学;2008年07期
11 关小红;张爱军;孙贻娟;陆小溦;谷瑞环;冯云;;滋养层细胞活检法分析人废弃胚胎源性囊胚发育与染色体异常[J];生殖与避孕;2011年02期
12 杨如镜,王兴玲,张展,铁心琴,韩书心;囊胚培养和移植的临床应用[J];中国民康医学;2004年05期
13 余来宁;杨东;危起伟;张繁荣;姚雁鸿;刘红艳;;中华鲟囊胚细胞的长期保存及其克隆胚胎发育观察[J];江汉大学学报(自然科学版);2008年01期
14 朱健生;季钢;张玲;洪名云;王朝红;姚桂东;;囊胚序贯培养在体外受精-胚胎移植中的应用[J];中国优生与遗传杂志;2008年08期
15 赵晓徽,岳天孚,随笑琳;玻璃化法冻融小鼠桑葚胚期和囊胚期胚胎的效果观察[J];中华妇产科杂志;2004年08期
16 朱楣光;胚胎的囊胚期培养和移植:在二个试管婴儿中心的结果和影响其后果的参数分析[J];国外医学(计划生育分册);2000年03期
17 黄锦;廉颖;郑晓英;吴昱琪;陈媛;乔杰;刘平;;着床前遗传学诊断后囊胚冻融的实验研究与临床应用[J];生殖与避孕;2012年03期
18 张美姿;分析形态学标准对选择第3天最好胚胎的精确性[J];国外医学(计划生育分册);2003年02期
中国重要会议论文全文数据库 前1条
1 徐炳森;周颖;吴丹丹;黄学锋;叶碧绿;;大鼠囊胚相对于桑椹胚新表达的基因研究[A];第二届全国不育症研讨会论文汇编[C];2007年
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 后晓南;小鼠囊胚体外侵袭肿瘤细胞现象的初步解析[D];重庆医科大学;2002年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 毕爱华;囊胚冷冻及冻融过程对人类囊胚超微结构影响研究[D];安徽医科大学;2006年
2 熊彦娥;维生素A酸对小鼠囊胚发育的影响[D];武汉大学;2005年
3 郭通航;小鼠囊胚活检用于植入前遗传学诊断及玻璃化冷冻囊胚的初步实验研究[D];安徽医科大学;2005年
4 李小佳;兔类ES细胞体外培养体系的优化[D];河南农业大学;2013年
5 方明珠;玻璃化冷冻小鼠囊胚的实验研究[D];郑州大学;2006年
6 高见红;活性氧(ROS)对小鼠早期胚胎染色体数目及相对长度的影响[D];延边大学;2006年
7 程东凯;精子DNA碎片对移植冻融后囊胚结局的影响[D];吉林大学;2013年
8 付敏;小鼠囊胚玻璃化冷冻研究及超微结构观察[D];昆明医学院;2006年
9 陈丽;家兔胚胎分割的研究[D];扬州大学;2007年
10 姜平;囊胚期与卵裂期胚胎培养及移植的对照研究[D];中国医科大学;2004年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978