经肝动脉灌注三氧化二砷对肝移植瘤作用的实验研究

【摘要】： 目的 探讨经肝动脉灌注As2O3对肝移植瘤的作用及其对肝脏的毒副作用。 方法 采用新西兰大白兔建立肝脏Vx-2移植瘤模型50只，随机平均分成5组：阴性对照组(生理盐水)、阳性对照组（顺铂1.28 mg.kg-1.d-1）、实验组1（As2O3 0.6 mg.kg-1.d-1）、实验组2（As2O3 1.2 mg.kg-1.d-1）、实验组3（As2O3 1.96 mg.kg-1.d-1）。移植瘤术后2周，经肝动脉插管灌注药物，连续7天，5周末切取肝肿瘤和邻近部位的正常肝组织，计算瘤重抑制率。通过光镜、电镜观察肿瘤组织的微血管变化、肿瘤细胞形态学变化及其线粒体的改变并进行线粒体比表面积定量分析。经免疫组织化学方法检测bcl-2、bax基因表达和VEGF表达。通过光镜、电镜观察肝细胞形态变化及其线粒体改变并进行线粒体比表面积定量分析，采血行肝功能检查检测不同浓度As2O3对肝的损伤及程度。 结果 1、实验组的平均瘤重抑制率分别为50.31%、59.58%和69.71%,实验组移植瘤瘤重低于阴性对照组，差异具有显著性。随着As2O3的剂量增加，实验组的瘤重减轻而平均瘤重抑制率增加，差异有显著性。提示经肝动脉灌注As2O3有显著的抗肝移植瘤作用，并呈剂量依赖。 WP=6 2、免疫组化检测显示实验组VEGF、bcl-2基因的表达低于对照组，差异有显著性，而实验组间VEGF、bcl-2基因的表达无差异性。实验组bax基因表达高于对照组，差异有显著性。实验组内bax基因表达，也有显著性差异。证实As2O3对肝移植瘤能明显地上调bax的基因表达，并存在剂量相关性；同时下调VEGF、bcl-2基因表达，无剂量相关性。 3、电镜观察显示实验组有典型的瘤细胞凋亡形态学改变，而阴性对照组和阳性对照组无类似改变；实验组移植瘤细胞线粒体发生不同程度肿胀、固缩，实验组分别与阴性对照组、阳性对照组、实验组组间以及同一实验组内肿瘤细胞与肝细胞的线粒体比表面积比较,差异具有显著性；实验组肿瘤组织毛细血管内皮细胞肿胀、细胞核碎裂、细胞坏死及微血栓形成，阴性对照组和阳性对照组无类似改变，表明As2O3在诱导实验组瘤细胞凋亡、损伤肿瘤细胞线粒体及肿瘤组织毛细血管方面有选择性。 4、光镜观察显示阳性对照组、实验组肝细胞不同程度浊肿、甚至气球样变，但无坏死发生，实验组与阴性对照组相比，差异有显著性。与阳性对照组比，差异无显著性。尽管电镜观察阳性对照组、实验组肝细胞的线粒体肿胀并不十分明显，但经定量分实验组肝细胞的线粒体比表面积小于对照组，差异具有显著性，肝细胞的线粒体比表面积在实验组内同样具有差异性。肝功能检测显示阳性对照组、实验组肝功能指标中LDH、AST、ALT不同程度升高，实验组与阴性对照组比较，差异有显著性；实验组与阳性对照组比，差异无显著性。实验 WP=7 组肝功能损害的趋势明显。这些结果表明经肝动脉灌注As2O3对肝细胞均有一定损伤作用，As2O3对肝细胞的损伤也具有剂量依赖特点。 结论 ①　经肝动脉灌注As2O3治疗兔Vx-2移植瘤，具有显著的抗肝癌作用，同时具有剂量依赖特点。②　对正常肝细胞有一定的损伤作用，也存在量效关系。