收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

急性脑梗死痫性发作兴奋性机制的实验研究

曾可斌  
【摘要】: 一、目的: 探讨急性脑梗死早期痫性发作兴奋性损伤机制及托吡酯干预效应。 二、方法 取成年雄性Wistar大鼠并预置海马电极,一周后线栓法制备大鼠右侧大脑中动脉阻塞(MCAO),同时监测脑电活动并相应分为脑缺血组及痫性发作组,检测海马组织中氨基酸浓度,以及胶质谷氨酸转运体(GLT-1)的免疫表达; 采用钝性分离1日龄SD大鼠双侧海马,分离培养海马神经细胞,观察细胞生长过程及用抗神经丝200抗体免疫细胞化学方法鉴定。第9~15天采用膜片钳全细胞模式检测神经细胞的基本电生理特性,及对L-谷氨酸和GABA的效应;观察不同浓度谷氨酸(2.5μmol/L~1000μmol/L)对神经细胞兴奋性影响及其作用特点;短时间、低浓度谷氨酸(5μmol/L)对神经细胞膜被动电生理特性、自发放电的影响,诱导神经细胞反复痫性放电,以及用吖啶橙/溴化乙锭染色法检测神经细胞死亡率; 观察托吡酯急性给药或预处理,对原代培养海马神经细胞痫性放 WP=8 电的影响。 三、结果 大鼠MCAO后2小时内,27.4%(17/62只)出现反复、阵发性棘波、慢波,即痫性放电。痫性发作组海马中天冬氨酸、谷氨酸和甘氨酸平均浓度显著高于脑缺血组(p0.05)。各组GABA平均浓度无显著性差异(p0.05)。在海马CA1和CA3区,痫性发作组GLT-1免疫表达显著低于脑缺血组(p0.05)。在齿状回,脑缺血组和痫性发作组GLT-1免疫阳性表达无显著性差异(p0.05)。 分离的海马细胞成活率大于93%,培养第7天后,细胞表面光洁,具有典型锥体神经细胞形态特征,并经抗神经丝200抗体免疫细胞化学方法证实,锥体神经细胞占78%,并可存活28天以上。 细胞封接成功率90%以上 (n500),静息膜电位为57.7+8.2mv(n=250)。膜电容Cm为15.9+3.6pF(n=62)、串联阻抗Rs为9.9+2.2MΩ(n=62),细胞膜的时间常数τ为157.8+51.6μs(n=62)。在全细胞模式下,神经细胞(n=216/250)的I-V曲线谱显示内向钠电流和外向钾电流。恒流刺激产生多个动作电位(n=69/72)。谷氨酸诱导海马锥体神经细胞出现可逆性去极化(n=26),并产生阵发性动作电位,GABA抑制电流刺激诱发的动作电位发放。 灌流不同浓度谷氨酸(5μmol/L~1000μmol/L)均可降低海马神经细胞膜电位,诱发可逆性去极化及动作电位,但灌流2.5μmol/L谷氨酸10分钟并不能诱发动作电位;不同谷氨酸浓度组间神经细胞膜电位及 WP=9 阈强度间有显著差异,高浓度组神经细胞的膜电位显著低于低浓度组,诱发动作电位的阈强度也显著低于低浓度组; 培养的神经细胞经谷氨酸作用,24小时后对照组及谷氨酸组神经细胞死亡率分别为13.3%和26.1%,谷氨酸组显著高于对照组(p0.05)。对照组(n=10)呈散发性自发性放电,频率低于3Hz占79.4%。谷氨酸组自发动作电位频率大于3Hz的放电占79.0%,并呈阵发性放电或簇性放电。谷氨酸(5μmol/L)处理后1~6天,海马神经细胞痫性放电百分率为62.5%~78.9%。 喷射苯妥英钠(10μmol/L)、托吡酯(20μmol/L,100μmol/L)抑制恒流刺激(40pA×200mSec)诱导海马神经细胞频发动作电位,动作电位分别减少100%、64.3%和75.0%。对于谷氨酸诱导海马神经细胞痫性放电,能被喷射苯妥英钠完全抑制(n=7/7),喷射托吡酯(100μmol/L)则部分抑制(n=5/8)。托吡酯(100μmol/L)预处理完全抑制谷氨酸诱导海马神经细胞(n=7)痫性放电。 四、结论 大鼠MCAO出现痫性发作,早期痫性发作占27.4%(17/62只); 海马组织中氨基酸浓度升高是MCAO后早期痫性发作原因之一; 大鼠MCAO后早期痫性发作与GLT-1免疫表达下调有关; 分离及原代培养大鼠海马神经细胞的操作方法简捷,有利于锥体神经细胞生长,可适用于膜片钳记录研究; WP=10 谷氨酸对海马神经细胞兴奋性呈浓度和时间依赖性。灌流谷氨酸10分钟内,5μmol/L可能是诱发海马神经细胞产生动作电位的最低浓度。 谷氨酸(5μmol/L)处理培养的海马神经细胞出现可逆性兴奋性损伤、或细胞死亡,海马神经细胞出现反复自发性痫性放电,具有急性脑梗死细胞损伤与癫痫放电特征。 托吡酯可干预体外模拟急性脑梗死谷氨酸所致的痫性放电(痫性发作); 托吡酯抑制海马神经细胞动作电位发放是一个渐进过程,具有时间依赖性和浓度依赖性,托吡酯预处理比喷射给药更能有效抗癫痫作用。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 周会英;;血栓通注射液治疗急性脑梗死54例[J];世界中医药;2011年04期
2 岳红;王迎;;血浆同型半胱氨酸水平与急性脑梗死低分子肝素试验病因分型的关系[J];中国药物与临床;2011年07期
3 赵淑芬;;奥扎格雷钠联合疏血通治疗急性脑梗死的疗效观察[J];实用医学杂志;2011年16期
4 王英;高松;李筠;田秀丽;宋瑾;;尤瑞克林治疗急性脑梗死患者的临床研究[J];中风与神经疾病杂志;2011年05期
5 陈澎;刘月华;孙锡波;;急性脑梗死患者治疗前后血浆同型半胱氨酸水平变化及意义探讨[J];临床医学;2011年09期
6 孙立仁;;葛根素注射液治疗急性脑梗死48例疗效观察[J];内蒙古中医药;2010年17期
7 刘国凤;孙宇;;血清同型半胱氨酸的测定在急性脑梗死诊断中的临床价值[J];实用医技杂志;2011年09期
8 侯文英;;依达拉奉治疗急性脑梗死的临床疗效观察[J];北方药学;2011年04期
9 张勇;;金纳多注射液治疗急性脑梗死40例[J];实用中医内科杂志;2010年10期
10 廉超玲;陆阿楠;廉霞;范波胜;;丹红注射液治疗急性脑梗死50例临床观察[J];中国社区医师(医学专业);2011年23期
11 郭艳萍;魏瑞丽;李旭静;;巴曲酶治疗急性脑梗死24例疗效观察[J];中国实用神经疾病杂志;2011年15期
12 孙希华;刘永辉;;疏血通注射液治疗急性脑梗死临床观察[J];中国实用医药;2011年23期
13 邢效如;陈长青;孙宗琴;陈丹丹;赵新春;武建宏;樊彦玲;;急性脑梗死血清高迁移率族蛋白B1水平的变化及意义研究[J];实用心脑肺血管病杂志;2011年08期
14 周松晶;;参芎葡萄糖注射液治疗脑梗死[J];现代预防医学;2011年13期
15 程乾;胡文涛;;盐酸法舒地尔联合川穹嗪治疗急性脑梗死临床疗效观察[J];中国实用医药;2011年16期
16 郝建军;;银杏达莫注射液治疗急性脑梗死50例疗效观察[J];吉林医学;2011年23期
17 胡金花;张弘;何芳;刘晓芳;关迎;王海军;戴银燕;马晓奎;;瑞通立治疗急性脑梗死一例报告[J];求医问药(下半月);2011年03期
18 信廷想;;CRP检测在急性脑梗死患者中的临床意义[J];中国现代药物应用;2011年14期
19 付享征;;抗感染佐治急性脑梗死38例临床观察[J];中国实用神经疾病杂志;2011年17期
20 董卫华;;依达拉奉治疗急性脑梗死临床观察[J];内蒙古中医药;2010年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 唐慧群;;盐酸法舒地尔治疗急性脑梗死对患者血清C-反应蛋白和疗效的临床分析摘要[A];中华医学会第十三次全国神经病学学术会议论文汇编[C];2010年
2 李新;邱伟庆;王纪佐;;急性脑梗死血小板膜糖蛋白和ADMA的表达及相互关系的研究[A];第十一届全国神经病学学术会议论文汇编[C];2008年
3 陈卓友;恽文伟;赵进委;向红兵;张志翔;钱传忠;丁新生;;无脑动脉狭窄急性脑梗死患者的临床特点及其预后[A];中华医学会第十三次全国神经病学学术会议论文汇编[C];2010年
4 鲍剑虹;郑荣远;夏君慧;朱蓓蕾;;尤瑞克林在急性脑梗死治疗中的应用[A];第十一届全国神经病学学术会议论文汇编[C];2008年
5 管姝轶;;尤瑞克林对急性脑梗死患者血脂的影响[A];浙江省中西医结合学会神经内科专业委员会第六次学术年会暨国家级继续教育学习班资料汇编[C];2008年
6 娄秋英;严梅秀;;急性脑梗死患者rt-PA溶栓的治疗及护理[A];全国外科护理学术交流暨专题讲座会议、全国神经内、外科护理学术交流暨专题讲座会议论文汇编[C];2010年
7 刘祖佑;;尤瑞克林治疗急性脑梗死临床疗效和安全性的研究[A];中华医学会第十三次全国神经病学学术会议论文汇编[C];2010年
8 谌剑飞;梁浩荣;蔡少华;奚玉凤;;针刺对糖尿病并发急性脑梗死血浆白介素-6及肿瘤坏死因子-α水平的影响[A];第三届全国中西医结合神经系统疾病学术会议论文集[C];2000年
9 戚英;赵卫锋;;急性脑梗死伴代谢综合征与动脉硬化的关系[A];中华医学会第十三次全国神经病学学术会议论文汇编[C];2010年
10 徐恩;缪学琼;;多模式磁共振影像技术在急性脑梗死早期诊断中的价值[A];第十一届全国神经病学学术会议论文汇编[C];2008年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 曾可斌;急性脑梗死痫性发作兴奋性机制的实验研究[D];重庆医科大学;2004年
2 陈卫银;益气活血复方SXD抑制急性脑梗死炎性反应的实验研究[D];成都中医药大学;2004年
3 陈秀;缺氧性脑损伤致痫性发作机制的实验研究[D];重庆医科大学;2008年
4 陈晓军;调和阴阳针刺法治疗急性脑梗死的文献及临床研究[D];广州中医药大学;2006年
5 桑鹏;头穴透刺对急性脑梗死脑保护机制的临床与实验研究[D];黑龙江中医药大学;2009年
6 王纪文;反复新生期大鼠痫性发作对神经发生的影响及其远期后果[D];山东大学;2005年
7 杜敢琴;短暂性脑缺血发作的实验和临床研究[D];华中科技大学;2008年
8 赵英霖;天红口服液治疗急性脑梗死风痰瘀阻证临床研究及对线栓大鼠局灶脑缺血再灌流模型的影响[D];南京中医药大学;2003年
9 何迎春;非溶栓指征急性脑梗死治疗时间窗及中药复方中风醒脑口服液干预的临床和细胞培养研究[D];成都中医药大学;2004年
10 邱伟庆;急性脑梗死血小板膜糖蛋白和ADMA的表达及相互关系的研究[D];天津医科大学;2008年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 王佳媛;急性脑梗死患者血小板CD62p与纤维蛋白原的变化[D];吉林大学;2011年
2 侯晓艳;血栓调节蛋白G127A基因多态性及其血浆水平与急性脑梗死的关系[D];昆明医学院;2011年
3 王秀菊;急性脑梗死患者血清脂联素与颈动脉内膜—中层厚度和同型半胱氨酸的相关性研究[D];天津医科大学;2010年
4 赵玉章;急性脑梗死血清对氧磷酶活性的研究[D];四川大学;2003年
5 刘致民;抗心磷脂抗体、纤维蛋白原与急性脑梗死关系的研究[D];兰州大学;2010年
6 徐玉龙;氧化应激与血尿酸水平在老年急性脑梗死发生中的关系研究[D];安徽医科大学;2010年
7 宋社更;急性脑梗死虚实证侯与其血清白蛋白、球蛋白关系研究[D];福建中医药大学;2010年
8 秦文玲;急性脑梗死患者血神经肽Y与一氧化氮合酶水平变化及其临床意义[D];大连医科大学;2010年
9 张小雨;急性脑梗死后血糖水平与轻度认知功能损害关系研究[D];山东大学;2010年
10 赵明明;急性脑梗死患者血浆8-异前列腺素F2α测定及其临床意义[D];吉林大学;2011年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 ;对急性脑梗死患者的影响[N];中国中医药报;2003年
2 吴一福;降纤酶治疗急性脑梗死疗效显著[N];中国医药报;2005年
3 邓沅佳;郑方算;中草药制剂在急性脑梗死中的应用[N];中国医药报;2004年
4 ;黄芪注射液治疗急性脑梗死[N];中国中医药报;2003年
5 岳金凤;颈内动脉注射溶栓治疗急性脑梗死[N];保健时报;2005年
6 冯学花;藻酸双酯钠与复方丹参治疗急性脑梗死疗效比较[N];农村医药报(汉);2007年
7 应庆;刺五加注射液治疗急性脑梗死[N];中国医药报;2005年
8 衣晓峰;颈内动脉注射溶栓联合静脉适时降纤及抗凝治疗 急性脑梗死患者致残率可降低40%[N];中国医药报;2005年
9 陈华;治疗脑梗死的药物选择原则[N];农村医药报(汉);2006年
10 ;甘露醇治疗急性脑梗死临床价值的探讨[N];中国医药报;2003年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978