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空肠弯曲菌galE基因变异株的临床意义研究

束晓梅  
【摘要】: 目的:研究鉴定galE基因敲除后空肠弯曲菌变异株脂寡糖结构及抗原性的改变。 方法:对galE变异株及其亲代株CJ(CJ HB9313,HS:19型)进行如下实验:①热酚水法分别提取两菌株脂寡糖(Lipo-oligosaccharide,LOS);②以亲代株的LOS 为抗原,全身免疫新西兰白兔制备抗LOS血清;③选用Tricine- SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳系统,对亲代株和galE基因变异株的LOS电泳分离,分别对其凝胶银染、免疫印迹(兔抗血清为第一抗体,HRP标记的羊抗兔IgG为二抗)及霍乱毒素配体印迹检查(HRP标记的霍乱毒素B亚单位为神经节苷脂GM1的特异性配体)。 结果:①galE变异株的LOS电泳迁移较亲代株快速,前者分子量约为4.5kDa,后者约5.5kDa,提示galE变异株的 LOS分子有部分丧失。②亲代株的LOS可与兔抗血清特异性结合,galE变异株LOS则丧失此结合能力,进一步证明galE变异株LOS的部分抗原结构缺失。③亲代株LOS可与特异性配体CTB(霍乱毒素B亚单位)结合显色,说明存在神经节苷脂GM1样结构(位于LOS外核糖基),而galE变 WP=9 异株的LOS不能与CTB结合,表明变异株LOS缺失的正是外核部分糖基,故结合在外核上的GM1等神经节苷脂模拟结构也均缺失。 结论:galE变异株丧失了脂寡糖外核糖基及其神经节苷脂GM1样结构,从而改变LOS的抗原性和对周围神经免疫致病力,并因此可能成为CJ安全减毒活菌苗的候选菌株。


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