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骨髓间充质干细胞移植治疗实验性巨结肠的实验研究

徐纪荣  
【摘要】: 目的: 建立一种适合MSCs移植的实验性巨结肠大鼠模型,探讨巨结肠模型结肠上皮离子转运的变化。 方法: 8-9周龄SD大鼠90只,随机分为两组。所有大鼠在氯胺酮麻醉下开腹,实验组用0.1%苯扎氯铵(BAC)处理大鼠降结肠浆膜40分钟,温盐水冲洗后关腹,对照组用生理盐水代替苯扎氯铵。分别于术后1、2、3、4、8周进行大体观察、钡灌肠X线检查,结肠测压、取处理段结肠行病理学检查,循环水浴药理学测定平滑肌收缩功能,利用短路电流技术检测结肠上皮离子转运的变化。 结果: BAC处理后1周,实验组大鼠出现腹胀,处理段结肠狭窄,反射性收缩消失,对乙酰胆碱敏感性增强,近端结肠扩张有大便堆积,且随着时间延长症状加重。病理学检查发现BAC处理后1周结肠神经节细胞明显减少、空泡变,3周后完全消失。短路电流检测提示,与对照组比较,实验组大鼠结肠上皮各时间点跨膜电压、基础电流明显降低,而钠离子吸收电流占基础电流的百分比升高。另外,由Forskolin所引起的氯离子分泌电流也明显高于对照组,但DPC阻断 WP=8 Forskolin所引起的Isc的百分比下降且小于1(对照组大于1),而结肠跨膜电阻两组之间无差异。 结论: 1、采用0.1%BAC处理降结肠浆膜成功建立了实验性巨结肠模型,为下一步进行结肠内MSCs移植分化为神经细胞的研究奠定了基础。2、实验性巨结肠模型动物结肠粘膜屏障功能未受损伤,但结肠上皮离子转运功能紊乱,提示巨结肠大便排空困难除与失神经之后的平滑肌和括约肌功能失调有关外,可能还与结肠离子转运的变化有关。


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