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头发mtDNA4977bp缺失与年龄的关系研究

郭燕丽  
【摘要】: 目的:研究头发mtDNA4977bp片段缺失与人群年龄的关系,建立相关方程,以期在微量物证中寻找更多的信息,为分子水平构建犯罪分子特征提供更多的可能。 方法:按中国人口自然分布规律,随机剪取54名汉族健康志愿者的头发若干,各取4根用无水乙醇清洗、蒸馏水漂洗后,自然风干,从近毛囊部位截取1.5cm,剪成0.3cm左右的片段,放入0.5ml EP管中,加chelex-100和蛋白酶K消化抽提mtDNA,用所设计的引物分别对mtDNA保守区和4977bp缺失突变区进行聚合酶链反应(PCR),若4977bp处不发生缺失,常规PCR不能扩增正常约5000bp的碱基,所以没有产物,反之,可以扩增出线粒体片段缺失后相应遗留序列的PCR产物。将扩增产物经琼脂糖凝胶电泳分离,EB染色后,在Bio-Rad紫外凝胶成像仪扫描成像,确定其激光密度。以保守内参照区扩增产物激光密度作为总量,缺失区扩增产物激光密度值作为缺失量,用缺失量/总量计算缺失率。 结果:25岁以下几乎无缺失,缺失区很少扩增出产物,大于25岁者缺失区逐渐可扩增出产物,且随年龄增长,相同条件下扩增产物增多,4977bp缺失率增大,各年龄段组间比较均P0.05。根据统计分析,缺失率与年龄有直线相关趋势,相关系数r=0.98,可以建立相关回归方程Age=0.74(±0.02)×dmtDNA+21.03(±0.80)(dmtDNA为缺失


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