难治性癫痫患者脑组织TRAP220、PMLC及其激酶的表达和临床意义

【摘要】： 第一部分难治性癫痫患者脑组织中甲状腺受体相关蛋白220表达及其临床意义 目的:了解难治性癫痫患者脑组织中甲状腺受体相关蛋白220(Thyroid Receptor Associated Protein 220 ,TRAP220)的表达,探索其临床价值。 方法:在基因芯片扫描获阳性结果基础上,分别用荧光定量PCR,免疫蛋白印迹及免疫组化研究40例难治性癫痫患者脑组织中TRAP220基因的表达,并与对照组进行比较。 结果:基因芯片扫描难治性癫痫/对照组的Cy5/Cy3值0.181;荧光定量PCR基因结果显示难治性癫痫组TRAP220 mRNA拷贝数/18S rRNA拷贝数均值为10.56E05,对照组TRAP220 mRNA拷贝数/18S rRNA拷贝数均值53.49E05。免疫蛋白印迹难治性癫痫组灰度值0.5963±0.218 3(±s),对照组0.9933±0.1302 (±s)(P0.05);免疫组化难治性癫痫组OD值0.3068±0.1081 (±s),对照组OD值0.6825±0.1576 (±s)(P0.05),所有结果均显示TRAP220在难治性癫痫脑组织中表达下调。 结论:难治性癫痫脑组织中TRAP220基因表达下调可能通过影响甲状腺素和雌激素信号传导途径而影响癫痫患者的脑保护和认知功能。 第二部分磷酸化肌球蛋白轻链及其激酶在耐药性颞叶癫痫患者脑组织中的表达 目的:探讨耐药性癫痫颞叶和海马脑组织中磷酸化肌球蛋白轻链(Phosphorylation of Myosin light chain, P-MLC)及其激酶(Myosin Light Chain Kinase, MLCK)的表达水平变化在癫痫芽生形成中的作用。 方法:免疫组化和免疫荧光联合检测32例耐药性颞叶癫痫中P-MLC及其激酶MLCK的蛋白质表达水平,并与对照组比较。 结果:耐药组颞叶光PMLC密度值0.3461±0.1270,对照组0.1904±0.0267(P0.05);耐药组海马PMLC光密度值0.4134±0.0227,对照组0.0955±0.0605(P0.05);免疫荧光与免疫组化结果一致,耐药组颞叶PMLC荧光强度值为32.408±1.5244,对照组11.254±1.4060(P0.05);耐药组海马PMLC荧光强度值29.428±1.5704,对照组9.53±0.8856(P0.05)。免疫组化和免疫荧光结果均显示耐药性颞叶癫痫组颞叶和海马组织P-MLC蛋白表达水平高于对照组,而MLCK的表达水平在颞叶组织和海马组织中较对照组无明显差异。 结论:P-MLC及其激酶MLCK的功能与苔藓纤维芽生关系密切,P-MLC蛋白质产物在耐药性癫痫中明显升高,但其磷酸化激酶MLCK的表达并不升高,提示MLCK和去磷酸化酶间动态平衡被打破是P-MLC升高的原因,而P-MLC的升高可能在苔藓纤维芽生的形成中发挥重要作用。