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双歧杆菌抗辐射损伤及其机制研究

蒲荣  
【摘要】: 目的 优化双歧杆菌定植,评价双歧杆菌抗辐射损伤的效应和探讨其拮抗机制。 方法 1.双歧杆菌定植条件的优化与评价。选用SPF级C57BL小鼠,优化双歧杆菌菌种、灌注方式、灌肠操作和灌肠器械,应用隐血实验、RT-PCR检测TLR2mRNA和HGF免疫组化评价定植条件优化的效果。 2.双歧杆菌抗辐射损伤的效应。选用SPF级C57BL小鼠和双歧杆菌菌种以及不同的照射剂量,通过观察血液WBC总数和30d小鼠生存率评价其拮抗效应。 3.双歧杆菌抗辐射的拮抗机制。选用SPF级C57BL小鼠,用双歧杆菌菌悬液灌肠和60Coγ射线全身照射,通过抗氧化指标(SOD、CAT和MDA)、脊神经组织细胞的超微结构检测、RT-PCR对脾脏组织用检测TLR2mRNA水平的表达以及检测肾脏bcl-2、NF-кBp65和Cytochrome C的蛋白的免疫组化,探讨其拮抗途径。 结果 1.定植条件优化后效果明显,隐血试验、RT-PCR(TLR2mRNA)和免疫组化(HGF)结果显示优化组效果最好(P0.05)。 2.双歧杆菌组与辐射损伤组相比,明显具有提高小鼠WBC最低值,延长30d存活率。 3.双歧杆菌处理组肝组织中SOD和CAT水平明显高于放射损伤组(P0.01),同时MDA明显低于放射损伤组(P0.01);电镜结果显示:放射损伤组与双歧处理组的细胞浆、细胞核和线粒体均明显肿胀,双歧处理组同时具有早期凋亡现象;RT-PCR结果显示:双歧处理组TLR2mRNA的表达明显高于放射损伤组;免疫组化结果显示,双歧处理组Cytochrome C的表达明显优于放射损伤组,而NF-кBp65和bcl-2则相反。 结论 双歧杆菌对辐射损伤具有较好的拮抗效应,具有显著的抗辐射作用,并可以通过清除自由基、抗膜脂质氧化、提高免疫机能和诱导细胞凋亡等途径降低辐射对小鼠的损伤。


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