5-氟尿苷棕榈酸酯脂质体的制备及其细胞毒性研究

【摘要】： 5-氟尿苷(5-fluorouridine, 5-FUR)是制备多种抗肿瘤、抗病毒药物(如氟铁龙、卡培他滨)的原料药,其抗肿瘤活性远高于目前临床上使用的氟尿嘧啶类药物,但因无选择性,毒副作用大,如:白细胞减少、血小板减少、消化道毒等,而未用于临床。 脂质体是一种良好的药物载体,与细胞膜的组成相似,能显著增强细胞摄取,从而减少药物剂量,提高药物疗效,降低不良反应。近年来,人们对脂质体进行改良,用一系列的生物分子对脂质体表面进行修饰,设计出pH敏感脂质体、免疫脂质体等具有主动靶向功能的新剂型(Targeted drug delivery systems, TDDS),近一步增强了脂质体作为药物载体的一系列优点。将脂质体做为5-FUR的载体,理论上能降低药物毒副作用,发挥药物的抗肿瘤活性。但5-FUR为亲水性药物,脂质体包封率较低。本文在不改变5-FUR药物活性的前提下,通过对5-FUR戊糖环上5′羟基进行酯化修饰,使其转变为脂溶性前药5-氟尿苷棕榈酸酯(5′-Palmitoyl -5- Fluorouridine 5-FURP),提高脂质体包封率。 本文采用逆向蒸发法分别制备5-氟尿苷棕榈酸酯脂质体(5′-Pal mitoyl-5-Fluorouridine liposome,5-FURP-L)。通过正交实验,筛选出制备5-FURP脂质体的最佳处方:药脂比1:10,磷脂-胆固醇比例3:1,超声时间5min。以最佳处方制备的脂质体平均包封率为94.35%。采用紫外分光光度法测定脂质体制剂中5-FURP的含量与包封率。实验结果表明该方法灵敏度高,可满足检测需要。用倒置相差显微镜观察5-FURP-L呈圆而规则的小单室结构。将脂质体分别在4℃和25℃下密闭放置1个月,以包封率、脂质体中磷脂含量变化为指标考察其稳定性。结果显示,脂质体于4℃贮存时,以上指标无显著变化,脂质体比较稳定。脂质体的体外释药实验表明5-FURP经脂质体包裹后具有较好的缓释效果。 本文以人乳腺癌细胞系MCF-7,人鼻咽癌细胞系CNE-1,人喉癌细胞系HEP-2为模型细胞,考察5-FURP-L的细胞毒性。细胞实验结果表明,酯化修饰并未改变5-FUR的抗肿瘤活性,5-FURP经脂质体包裹后,细胞毒性较游离药物增高。针对以上三种不同肿瘤细胞,IC50分别是游离药物的5、3.4、2.6倍,说明脂质体能显著增强细胞摄取,具有提高药物疗效,降低药物剂量的作用。使5-FUR这一廉价原料药有了进一步开发的价值。