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超声微泡介导pEGFP-N1转染人牙龈成纤维细胞的初步研究

骆书美  
【摘要】: 目的:探讨超声破坏微泡介导pEGFP-N1转染人牙龈成纤维细胞的适宜参数、转染效率及有效性。 方法:体外原代培养HGF。以pEGFP-N1为报告基因,微泡造影剂为载体,用超声微泡介导pEGFP-N1转染HGF。实验组分为质粒组、微泡+质粒组、超声+质粒组、超声+微泡+质粒组。超声+微泡+质粒组按不同的转染条件分成24组。转染48 h后倒置荧光显微镜下观察GFP的表达,MTT法检测HGF活性。 结果:超声微泡介导pEGFP-N1对HGF的转染效率明显高于其他实验组。优化转染条件后,频率300KHZ,声强1.5w/cm2,连续波,辐照时间60s,微泡浓度10%,质粒浓度6.67ug/ml时,转染率较高。 结论:在一定条件下,超声微泡能够促进外源基因对HGF的转染。


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