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鲍曼不动杆菌对β-内酰胺类抗生素的耐药机制研究

曹弟勇  
【摘要】: 目的 调查四川北部地区鲍曼不动杆菌的临床分布特征及耐药情况,研究其产β-内酰胺酶的特性及类型,并对β-内酰胺酶进行基因与同源性分析,了解β-内酰胺酶在耐药性形成中的作用,阐明鲍曼不动杆菌对β-内酰胺类抗生素的耐药机制,为临床合理用药提供参考依据。 方法 1.对临床分离的鲍曼不动杆菌作标本来源、科室分布的分析,了解其在医院感染中的分布特征; 2.用琼脂二倍稀释法检测临床常用16种抗菌药物对78株鲍曼不动杆菌临床分离株的MIC,分析其对临床常用抗菌药物的耐药性,获得耐药菌株; 3.从耐药鲍曼不动杆菌株提取β-内酰胺酶,用CTL进行酶活性检测;琼脂纸片扩散法检测产超β-广谱内酰胺酶(ESBLs)菌株;提取产酶菌株质粒DNA,用特异性酶引物对质粒DNA进行PCR扩增,DNA序列测定,分析其同源性,以确定产酶基因的位置及类型。 结果 1. 78株鲍曼不动杆菌的标本来源主为痰标本;科室分布主要在ICU病房。78株鲍曼不动杆菌对MEP耐药率极低,仅1.3%,对头孢哌酮/舒巴坦耐药率37.2%,对其它13种抗菌药的耐药率均在60%以上。但对IMP完全敏感。 2.经对40株多重耐药的鲍曼不动杆菌酶活性检测,有38株产β-内酰胺酶;对21株酶活性高的菌株进行琼脂纸片扩散法检测,有9株菌产ESBLs。 3.提取21株酶活性高的细菌的质粒DNA经PCR扩增检测发现,21株鲍曼不动杆菌均扩增出TEM型β-内酰胺酶基因,其中7株还扩增出CTX-M型β-内酰胺酶基因,14株扩增出SHV型β-内酰胺酶基因。21株细菌中,7株菌的质粒DNA扩增出TEM、SHV两种类型的酶基因,7株菌的质粒DNA扩增出TEM、CTX-M、SHV三种类型的酶基因。 4.DNA测序结果显示本地区鲍曼不动杆菌携带的β-内酰胺酶基因主要为bla-TEM-128,同时也有携带bla-SHV和bla-CTX-M的菌株;21株耐药产酶的鲍曼不动杆菌携带两种以上耐药基因的比例高达66.6%。 结论 1.本地区鲍曼不动杆菌主要以引起危重病人的呼吸道感染为主。 2.本地区鲍曼不动杆菌除对碳青霉烯类抗菌药物亚胺培南和美洛培南敏感外,对头孢哌酮/舒巴坦有一定的敏感性,对临床常用其它抗菌药物,尤其对一、二、三代头孢菌素均表现出极高的耐药性,多重耐药现象严重,治疗多重耐药鲍曼不动杆菌感染时宜首选碳青霉烯类抗菌药。 3.质粒介导的β-内酰胺酶的产生是本地区鲍曼不动杆菌对β-内酰胺类抗生素耐药的重要机制之一,酶的基因型主要为bla-TEM-128,也有bla-SHV-5/1b/96/56/71、bla-CTX-M- 2,部分菌株同时存在有两种以上β-内酰胺酶基因参与细菌耐药性的形成。


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