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原花青素对急性高眼压后视网膜作用的实验研究

晏兴云  
【摘要】: 目的急性高眼压是眼科临床上常见的急症,主要见于急性闭角性青光眼、青光眼睫状体炎综合征、睫状环阻塞性青光眼以及一些内眼手术后等。急性高眼压发作时,视网膜常常会受到机械压迫、组织缺血缺氧等损伤,而在眼压降低,血供恢复后,又极易通过自由基和兴奋性氨基酸的过度释放、细胞内钙离子超载、炎性细胞因子和细胞黏附分子的高表达等产生缺血再灌注,进一步损伤视网膜,使视功能严重受损。本研究采用大鼠前房生理盐水灌注升高眼压的方法建立急性高眼压动物模型,从形态、功能等多方面研究急性高眼压后大鼠视网膜受损的情况,以及利用原花青素干预后视网膜的情况,并初步探讨原花青素在急性高眼压后对视网膜作用的机制。 方法实验设正常组、模型组、PC干预组,其中PC干预组又根据药物剂量不同分为PC低剂量组和PC高剂量组共四组。选用成年、健康SD大鼠,PC各剂量组用原花青素混悬液按100mg/kg.d和300mg/kg.d的剂量灌胃给药。正常组和模型组同步灌服蒸馏水。造模方法:用连接生理盐水的4号半头皮针刺入大鼠前房维持1小时,输液瓶高度设为150cm。于造模后48h行分光光度计检测视网膜中超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD),丙二醛(Maleic dialdehyde,MDA),一氧化氮(Nitrogen monoxidum,NO),钙离子(Calcium ion,Ca2+)和谷氨酸(Glutaminic acid,Glu)含量的变化;并于6h,24h,48h和72h分别做视网膜HE染色光镜切片和免疫组化半定量检测大鼠视网膜半胱天冬酶-3(Caspase-3)表达水平及透射电镜观察大鼠视网膜超微结构。 结果与正常组视网膜相比较,模型组视网膜SOD活性下降,MDA、NO、Ca2+、Glu含量增加,Caspase-3表达水平升高,视网膜组织及细胞线粒体水肿,细胞膜部分破裂,胞浆空泡化,胞核染色质边聚、浓缩,溶解,镜下可见大量凋亡小体。与模型组相比,PC干预组视网膜SOD活性升高,MDA、NO、Ca2+、Glu含量降低,Caspase-3表达降低,视网膜超微结构损伤减轻。 结论本实验方法成功建立了大鼠急性高眼压后视网膜损伤模型,能满足进一步实验的需求。针对视网膜损伤,原花青素可提高SOD活性,降低MDA、NO、Ca2+、Glu含量,减少Caspase-3表达从而改善超微结构损伤而保护视网膜。


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