收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

硫酸长春新碱聚合物超声微泡造影剂研究

凌旭  
【摘要】: 超声造影是近年随着超声造影剂制备技术和图像显影技术的不断完善逐步发展起来的新技术。超声破坏携带药物或基因的微泡造影剂定位释放技术,是一种新型的无创性基因嫁接与药物释放技术。其作用机制主要为空化效应(Cavitation)和“声孔作用”(Sonoporation)。 超声微泡造影剂(Ultrasound Microbubble Constrast Agent, UMCA)通常是指直径为2μm至几十微米的有壳微气泡,微泡壳厚1至500 nm,壳体材料多为白蛋白,磷脂,半乳糖,聚合物等,泡内气体通常是CO2,氟碳气(C3F8,C4F10),N2以及空气等。 长春新碱(Vincristine, VCR)是提取自夹竹桃科植物长春花的一种生物碱,临床上广泛用于治疗神经细胞瘤、脑瘤、肺癌等实体瘤,属细胞毒类抗肿瘤药物,其作用机制为结合微管蛋白,抑制微管蛋白的聚合,影响微管的装配及纺锤丝的形成。 该课题UMCA采用聚乙二醇(PEG)修饰,微泡表面被柔顺而亲水的PEG链部分覆盖,极性PEG增强UMCA的亲水性,减少血浆蛋白与UMCA膜的相互作用,降低被巨噬细胞吞噬的可能,延长在循环系统的滞留时间,可有效提高靶向效率。 该课题以PLGA/(PLGA-PEG)为包合材料,NH4HCO3为致孔剂,采用复乳-溶剂挥发技术制备硫酸长春新碱乳酸-乙醇酸共聚物-聚乙二醇超声微泡造影剂( Vincristine-loaded PLGA-PEG Ultrasound Microbubbles Contrast Agent, VCR-PLGA-PEG-UMCA),利用UMCA作为药物载体,借助体外超声空化的能量在预定肿瘤区域击破微泡,从而使药物在局部组织释放和渗透,提高局部药物浓度,达到靶向治疗的目的。 第一部分处方前研究 1.建立VCR的UV含量测定方法,其标准曲线方程为A = 0.0121C-0.0025,r = 0.9998,在4.00 ~ 20.00μg·mL-1范围内浓度与吸收度线性良好,精密度、回收率、稳定性均符合方法学要求。 2.采用摇瓶法测定VCR在不同CH2Cl2/PBS(pH 3.0,pH 4.0,pH 5.0,pH 6.0)和CH2Cl2/H2O体系中的表观油/水分配系数(P),其值分别为0.855,1.887,2.174,2.224,2.264,表明VCR亲脂性随pH值增高而增加。为了提高包封率,使VCR尽量分布在水相,制备UMCA时可以选择CH2Cl2/PBS(pH 4.0)的油水体系。 第二部分VCR-PLGA-PEG-UMCA制备 1.以微泡的粒径和形态为指标,考察超声时间,乳化剂类型,乳化剂浓度,内水相体积和NH4HCO3浓度对微泡形态的影响;以EE为指标,单因素试验初选制备条件,分别为投药量,不同有机溶剂,油水相体积比,PLGA/(PLGA-PEG)比例,PLGA/(PLGA-PEG)浓度,Span80浓度,内、外水相pH,外水相NaCl浓度,CH2Cl2挥干方法对VCR-PLGA-PEG-UMCA包封率的影响。 2.单因素试验考察筛选出对VCR-PLGA-PEG-UMCA制备工艺影响较大因素:投药量,内水相与油相体积比,PLGA/(PLGA-PEG)浓度, PLGA/(PLGA-PEG)比例。采用正交试验设计优化VCR-PLGA-PEG-UMCA处方,以包封率(S)为指标进行评分,优选出最佳工艺条件:投药量为2.0 mg,油相与水相体积比为2:0.1,PLGA/(PLGA-PEG)的浓度为0.5%,PLGA/(PLGA-PEG)的比例为2:1。 3.最佳处方制备的VCR-PLGA-PEG-UMCA外观形态为球形或类球形,表面光滑,无明显黏连,粒径分布均匀,平均粒径为1.27μm,粒径范围为500~1400 nm,包封率为(37.63±0.61)%,载药量(1.25±0.23)%,Zeta电位为-24.88 mV,分散性良好。 4.初步稳定性考察载药微泡冻干粉在4℃下60 d内稳定性良好;生理盐水复溶VCR-PLGA-PEG-UMCA一周后观察,颜色变浅,呈白色,底部有沉积。一月后,溶液分层,上层颜色为浅白色,下层多数沉淀。 第三部分VCR-PLGA-PEG-UMCA体外释药性质研究 1.建立VCR体外释放UV分析测定方法,其标准曲线方程为A = 0.0157 C-0.0007,r = 0.9997,在2.00~20.00μg·mL-1浓度与吸光度线性良好,精密度、回收率、稳定性均符合方法学要求。 2.比较以分子量2万和4万PLGA为膜材制备微泡的体外药物释放行为,实验表明:以分子量2万PLGA制备微泡体外药物释放较快,约20天基本释放完毕,而分子量4万PLGA制备微泡体外药物约30天基本释放完毕。 3. PEG对VCR-PLGA-PEG-UMCA体外释药行为有一定影响。添加PEG能加快微泡的药物释放,可能原因是PEG具有亲水性,增加PLGA的降解速率从而提高溶出,故释药速率加快。 4.考察超声照射和未加超声照射下微泡的体外药物释放行为,实验结果表明:未超声照射组微泡释药符合缓释制剂的释放特点,超声照射组60 min内释放药物达80%以上。 第四部分VCR-PLGA-PEG-UMCA体内外超声显影成像初步研究 1.采用超声诊断仪观察微泡具有良好的增加超声信号的能力,体外成像清晰。 2.使用超声诊断仪观察微泡在超声照射作用下具有增强兔体内心腔超声显影效果,为进一步超声定位靶向给药提供直接可靠的依据。 第五部分VCR-PLGA-PEG-UMCA兔体内药动学初步研究 1、建立兔血浆中VCR的HPLC含量测定方法,在0.105 ~ 20.010μg·mL-1浓度范围内线性良好,以浓度为横坐标,峰面积为纵坐标,其回归方程为:A = 264.43 C– 58.237,r = 0.9996。该方法准确可靠,专属性强,重现性好,符合血药浓度分析的要求。 2、以VCR注射液为参比,对VCR-PLGA-PEG-UMCA在兔体内的药动学进行研究,采用DAS软件进药代动力学行数据分析。结果表明:VCR-PLGA-PEG-UMCA和VCR注射液均符合双隔室模型(权重系数为1/C2),两种制剂药时曲线相似。从AUC0-24h来看,VCR-PLGA-PEG-UMC的生物利用度有所提高。 该课题以PLGA-PEG为包膜材料、NH4HCO3为致孔材料,采用复乳-溶剂挥干技术制备VCR-PLGA-PEG-UMCA。其体外释药受聚合物材料溶蚀速率控制,具有良好的缓释效果。 该课题以微泡的粒径、形态和包封率为指标,探讨不同因素对制备UMCA条件的影响,建立UV测定包封率和体外药物释放的方法。 获得的VCR-PLGA-PEG-UMCA体内外显影效果好,其兔体内药动学参数AUC增加,生物利用度好,为进一步超声破坏微泡的靶向释药提供一定的基础。该课题的设计、试验及制剂的体内外评价目前尚未见相关文献报道。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 吕伟;裴瑾;王斓;张海锋;柳怀玉;韩冰;;紫杉醇长效PLGA微球的制备、性质及其在体内抗H22型肝癌的疗效[J];中国老年学杂志;2011年12期
2 张华林;冯佳;李咏梅;;PLGA牙周引导组织再生膜的仿生矿化研究[J];哈尔滨医药;2011年04期
3 费洁;蒋珺;陈亚青;;超声联合微泡造影剂介导FD500转入两种人前列腺癌细胞[J];中国医学影像技术;2011年08期
4 康娟;吴小翎;张勇;冉海涛;王志刚;;载多西紫杉醇脂质微泡联合超声靶向微泡破裂对兔VX2肝癌微血管的作用[J];中国介入影像与治疗学;2011年05期
5 凌旭;张良珂;袁佩;李攀;冉海涛;;载长春新碱微泡的体外释药性质研究[J];时珍国医国药;2011年06期
6 郭美卿;范海南;杨志强;许鑫华;;镁合金支架双重可控释放涂层的制备及药物释放性能研究[J];材料导报;2011年10期
7 郑海荣;钱明;;超声造影微泡:敏锐成像、定点给药与治疗[J];中国医疗器械信息;2011年07期
8 高小寒;魏蓓蓓;田玲玲;刘一浓;秦明杰;胡振华;吴飞;;乳液法静电纺丝PLGA组织工程缓释纤维的研究[J];现代生物医学进展;2011年12期
9 谭羽莹;张舵;李玉新;孙颖;徐洋;李春;金洪娟;邵英;;改性纳米羟基磷灰石/PLGA材料同骨髓基质干细胞复合后相关生物学评价[J];中国组织工程研究与临床康复;2011年25期
10 耿兴超;张琳;宋莹;杨锐;涂家生;黄芝瑛;孙会敏;李波;;三种注射用新辅料对Beagle犬类过敏及过敏反应研究[J];中国药事;2011年07期
11 高飞艳;刘会玲;杨燕;祝秉东;杨毓琴;;生物可降解微球作为HPV-E7蛋白免疫佐剂的研究[J];现代生物医学进展;2011年12期
12 徐智章;;评述如何选定正确医学超声术语[J];上海医学影像;2011年02期
13 施伟斌;江翰;王雪峰;王子豪;丁晶;刘颖斌;;兔VX2肝癌模型的建立及纳米微泡造影剂在模型早期检测中的应用[J];肝胆外科杂志;2011年03期
14 王身国;;新的超声造影剂将可预报心梗[J];心血管病防治知识;2009年04期
15 江翰;王雪峰;王子豪;徐斌;施伟斌;;兔VX2肝癌模型的建立及纳米微泡造影剂在模型早期检测中的应用[J];临床肝胆病杂志;2011年07期
16 张群霞;骆杰;冉海涛;王志刚;郑元义;张辉;钟世根;李巧;;比较脂质微泡与聚合物超声造影剂的微循环流变学[J];中国医学影像技术;2011年08期
17 李巧;李兴升;王志刚;冉海涛;钟世根;凌智瑜;李攀;陈庆伟;;超声微泡联合Ad-EGFP/HIF-1α介导EPCs移植治疗大鼠心肌梗死[J];中国介入影像与治疗学;2011年04期
18 徐慧;冯蕾;;即时超声微泡造影诊断胰腺占位性病变的价值[J];中国医学影像学杂志;2011年09期
19 庄华;杨志刚;;超声造影时间强度曲线在腹腔脏器功能及肿瘤灌注成像定量研究中的应用进展[J];生物医学工程学杂志;2011年03期
20 项明慧;;超声造影技术在临床上的应用[J];沈阳医学院学报;2011年03期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 陈茜;周青;汪迎晖;王潇;郭瑞强;;携抗ICAM-1抗体的Sono Vue微泡造影剂靶向识别受损内皮的实验研究[A];第十届全国超声心动图学术会议论文[C];2010年
2 杨伟;严飞;靳巧锋;陈娟娟;李露;郑海荣;;淋巴细胞靶向微泡造影剂的体外研究[A];中国声学学会第九届青年学术会议论文集[C];2011年
3 陈茜;周青;汪迎晖;王潇;郭瑞强;;携抗ICAM-1抗体的SonoVue微泡造影剂靶向识别受损内皮的实验研究[A];中华医学会第十次全国超声医学学术会议论文汇编[C];2009年
4 钟世根;王志刚;张群霞;骆杰;张辉;;载10-HCPT靶向脂质微泡的制备及体外寻靶能力实验研究[A];中国超声医学工程学会第八届全国腹部超声学术会议论文汇编[C];2010年
5 卞叶萍;李鹏;童嘉毅;陈龙;王庆捷;沈祥波;宋佳贤;;超声联合一氧化氮微泡体外干预大鼠骨髓间充质干细胞安全性的研究[A];中国微循环学会2011年全国学术会议论文汇编[C];2011年
6 周希瑗;;激光爆破微泡对视网膜母细胞瘤细胞膜通透性影响的实验研究[A];中国超声医学工程学会第七届全国眼科超声诊断学术会议论文摘要汇编[C];2009年
7 张群霞;王志刚;冉海涛;郑元义;李晓东;卢岷;;超声破坏微泡对心肌细胞膜通透性影响的研究[A];第十届全国超声心动图学术会议论文[C];2010年
8 纪毅璞;左岩;成惠峰;徐志伟;彭佳良;张洋;;高透明无微泡复合防火玻璃研究[A];2010全国玻璃技术交流研讨会论文集[C];2010年
9 程娟;徐斐燕;顾胜利;陈亚青;;超声微泡造影剂介导EGFP对兔眼视网膜转染效率的实验研究[A];中国超声医学工程学会第三次全国浅表器官及外周血管超声医学学术会议(高峰论坛)论文汇编[C];2011年
10 王志刚;凌智瑜;冉海涛;任红;黄爱龙;刘杞;赵春景;唐海林;宫琳;蒲世玉;钱妍;;超声微泡造影剂对心肌组织的生物学效应及介导VEGF基因转染大鼠心肌的实验研究[A];庆祝中国超声医学工程学会成立20周年——第八届全国超声医学学术会议论文汇编[C];2004年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 戴文达;新型结构PLGA/胶原三维可降解复合材料用于软骨再生的效果研究[D];复旦大学;2010年
2 韩瑞玲;鱼精蛋白包覆PLGA纳米粒用于疫苗载体的初步研究[D];华中科技大学;2010年
3 刘福娟;聚乳酸/乙醇酸共聚物(PLGA)仿生细胞外基质的制备、表征及其与蛋白界面交互作用的研究[D];东华大学;2010年
4 徐洋;表面改性的纳米羟基磷灰石/PLGA复合材料的制备及成骨活性实验研究[D];吉林大学;2010年
5 皋月娟;微泡增强的超声空化阻断肝脏和肝肿瘤微循环的实验研究[D];第二军医大学;2010年
6 王明新;MSCs附和PLGA电纺支架修复兔跟腱损伤的实验研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2012年
7 董静文;PLGA载姜黄素纳米粒对人宫颈癌Hela细胞的抑制作用及机制探究[D];中南大学;2012年
8 杨艳芳;动/静态条件下PLGA与PLGA/β-TCP多孔支架的降解与释药行为[D];天津大学;2010年
9 胡敏;超声微泡介导基因转染防治移植静脉再狭窄的实验研究[D];华中科技大学;2010年
10 隋润钤;复合心肌组织工程联合大网膜移植术治疗心肌梗死的实验研究[D];中南大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 熊小燕;VCAM-1分子靶向的PLGA聚合物微泡的合成和表征[D];电子科技大学;2011年
2 凌旭;硫酸长春新碱聚合物超声微泡造影剂研究[D];重庆医科大学;2010年
3 季培红;PLGA-PLGA/BG微球双层修复支架材料的研究[D];华南理工大学;2010年
4 常丽云;堆型艾美耳球虫3-1E重组质粒PLGA微球包被技术研究[D];河北农业大学;2011年
5 许尧祥;复合壳聚糖微球PLGA支架的制备及其对蛋白缓释作用的实验研究[D];青岛大学;2010年
6 张亚萍;载血卟啉PLGA超声造影剂的优化制备及其治疗小鼠肝癌移植瘤的实验研究[D];重庆医科大学;2010年
7 于玮洁;聚乳酸—羟基乙酸(PLGA)网作为组织工程真皮替代物骨架的研究[D];浙江大学;2010年
8 李忠义;PLGA-HA复合支架与异体骨体外细胞相容性的对比实验研究[D];中国医科大学;2010年
9 谭羽莹;利用表面改性纳米羟基磷灰石/PLGA材料构建组织工程化骨的实验研究[D];吉林大学;2011年
10 张基昌;新型冠脉可降解支架材料PLGA,PLGA-PEG与兔血管平滑肌细胞相容性的研究[D];吉林大学;2004年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 胡连荣;“纳米微泡”原理挑战交叉学科[N];大众科技报;2004年
2 韩彬 通讯员 韩建栋 祁双虎;微泡技术:杀入市场的黑马[N];中国石油报;2004年
3 唐爱平实习生 龚卓 通讯员 张莉;三一研制成世界首台高效微泡沥青砂浆车[N];湖南日报;2007年
4 赵碧君;三一重工研制成高效微泡沥青砂浆车[N];上海证券报;2007年
5 邓常青夏天;三一重工创新产品成功应用[N];证券时报;2007年
6 ;前景诱人的治疗性超声[N];中国中医药报;2002年
7 汪炳青 周李帅;矿大副校长荣获中国工程界最高奖项[N];中华新闻报;2008年
8 伍振;京津城际轨道施工创造三项全国记录[N];中国质量报;2007年
9 庄愉;多层片释药系统研究进展[N];中国医药报;2002年
10 ;治疗性超声前景光明[N];中国医药报;2002年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978