解聚复肾宁对大鼠肾小球系膜细胞增殖和细胞外基质分泌的影响
【摘要】:
目的:探讨中药复方解聚复肾宁(黄芪、地黄、黄连、丹参、葛根、姜黄等)(JJFSN)治疗早期糖尿病肾病(DN)的作用机制。
方法:以25mM浓度的葡萄糖诱导系膜细胞(mesangial cell,MC)增殖以及细胞外基质(ECM)分泌。采用血清药理学方法制备不同浓度JJFSN含药血清,加入培养液中,用MTT法和流式细胞技术(flow cytometry,FCM)分别检测细胞增殖活性和细胞周期;用放射免疫技术(RIA)检测细胞培养上清中Ⅳ型胶原(ColⅣ)及层粘连蛋白(Ln)的含量。
结果:MTT显示,JJFSN含药血清可抑制高糖诱导的MC过度增殖(P0.05),并且这种作用具有量效和时效依赖关系。在JJFSN高剂量组作用48h后,细胞增殖低于同一时间正常糖组(NG组)(P0.05)。流式细胞技术分析表明,JJFSN可逆转高糖对细胞周期的影响,使G0/G1期细胞比例增加,S期细胞比例下降(P0.05);在高浓度时还能促进MC细胞凋亡。RIA显示,高糖可诱导MC ColⅣ和Ln的分泌(P0.05),JJFSN可逆转高糖对ColⅣ和Ln分泌的影响,降低MC培养上清中ColⅣ和Ln的含量(P0.05),并且这种作用随着JJFSN浓度的增加而增强。JJFSN高剂量组作用48h后,上清中ColⅣ和Ln含量减低最明显,与NG组的差别无统计学意义(P0.05)。
结论:JJFSN可以抑制高糖诱导的MC增殖活性增强,阻滞MC细胞周期,诱导MC凋亡,从而有效抑制MC过度增殖;同时,JJFSN还可以减少高糖诱导的MC ECM的过量分泌,这可能是其防治DN早期的作用机理。