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姜黄素对新生大鼠坏死性小肠结肠炎模型的疗效评价及其机制的研究

魏小娣  
【摘要】: 第一部分新生大鼠肠组织Toll样受体4的表达水平与坏死性小肠结肠炎发生率的关系研究 目的: 观察不同日龄大鼠肠组织TLR4的表达情况及NEC发病情况,分析TLR4的表达量与坏死性小肠结肠炎发生率的关系。 方法: 将48只新生S-D大鼠随机分为六组,分别为A组、B组、C组、D组、E组和F组。A组、B组及C组大鼠分别于第1、3、7天处死,处死的大鼠均取近回盲部肠组织做病理切片,采用免疫组化法检测TLR4的表达;D组、E组及F组分别于第1、3、7天采取缺氧复氧冷刺激+LPS灌胃+人工喂养三因素联合方法建模,建模后空腹1天处死,处死的大鼠均取近回盲部肠组织做病理切片,采用HE染色观察组织学变化、做组织损伤评分及NEC发生率统计。 结果: 大鼠肠组织TLR4的表达量A组:5.44±0.03B组:5.22±0.24C组:4.92±0.09,且各组之间比较均有统计差异(P0.05);D组、E组及F组各组病理评分分别为D组:3.42±0.61E组:2.47±0.39F组:1.68±0.34,各组之间比较均有统计差异(P0.05);D组、E组及F组各组NEC的发病率分别为:D组:100%(8/8)E组62.5%(5/8)E组15%(2/8)。 结论: 新生大鼠肠粘膜有大量的TLR4表达,但是随着日龄的增加,大鼠肠道TLR4表达呈显著下降的趋势,且随着大鼠日龄的增加其NEC发生率也降低,故我们推测:大鼠肠粘膜TLR4的表达量可能与NEC的发生有着密切的关系。 第二部分姜黄素对新生大鼠坏死性小肠结肠炎动物模型的疗效评估及其机制的研究 目的: 探讨姜黄素作用于大鼠坏死性小肠结肠炎(NEC)模型的疗效及其作用机制。 方法: 经人工喂养、缺氧复氧冷冻及脂多糖灌胃后建立NEC动物模型。实验共分4组,分别为正常对照组(A组)、NEC模型组(B组)、姜黄素干预组(C组)及溶剂组(D组)。各组于第4天处死大鼠,取近回盲部肠组织做病理切片,采用HE染色观察组织学变化并做组织损伤评分、免疫组化法检测TLR4、NF-κB、p38 MAPK的表达。其它肠组织制备组织匀浆取上清用ELISA法检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素-6 (IL-6)的含量。 结果: A,D组大鼠无NEC症状,B组大鼠出现典型的NEC症状,C组大鼠与B组相比NEC症状出现的较晚、较轻。B组与A,D组相比肠组织病理学评分及NF-KB,TNF-α,IL-6的表达显著增高(P0.05);C组与B组相比其表达显著降低(P0.05)。B、C组与A,D组相比肠组织TLR4的表达显著降低(P0.01),C组与B组相比其表达升高,但是无统计学差异(P0.05)。 结论: 姜黄素干预对NEC大鼠具有一定的保护作用,其机制可能是抑制NF-KB、P38 MAPK、TNF-α及IL-6的表达从而发挥抗炎效应。由于仅做了蛋白水平TLR4的检测,故姜黄素对TLR4的影响尚不能确定。


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