收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

siRNA抑制人卵巢癌SW626细胞CXCR4基因的研究

汤容  
【摘要】: 目的:研究应用RNA干扰技术沉默人卵巢癌SW626细胞趋化因子受体4(CXCR4)基因后,卵巢癌细胞CXCR4的蛋白表达情况,对卵巢癌细胞增殖活性的影响,推断其与卵巢癌发生、发展、治疗及预后的关系。 方法:根据CXCR4基因编码序列及RNAi寡核苷酸设计原则,设计合成两对针对CXCR4基因的siRNA片段和1对FAM标记的阴性对照siRNA片段,序列经BLAST查询,确定为CXCR4特异性序列,排除与其他基因同源性。实验分为四个组:空白对照组、阴性对照组、实验S1组和实验S2组。用脂质体转染方法转染至卵巢癌SW626细胞中,荧光显微镜观察检测转染效率,采用Western blot检测RNA干扰后卵巢癌SW626细胞CXCR4蛋白的表达情况。利用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测转染前后细胞增殖的情况。 结果:1、脂质体转染法转染卵巢癌SW626细胞48小时后,荧光显微镜观察,发现当卵巢癌细胞处对数生长期,培养24h后融合度为90%时进行转染,质粒和脂质体比例为1:3时转染效率最高,发绿色荧光的细胞数可达到70%以上。 2、转染48小时后,用western blot法检测,①实验S1组和S2组与空白对照组和阴性对照组比较,卵巢癌SW626细胞CXCR4/β-actin蛋白表达水平降低,蛋白表达明显受抑制(P0.05)。②阴性对照组和空白对照组比较:CXCR4/β-actin蛋白表达无显著性差异(P0.05)。③实验组Sl组和S2组比较:无显著性差异(P0.05)。 3、转染24h、48h、72h后,MTT法检测细胞增殖情况,结果显示:①实验S1组和S2组与空白对照组和阴性对照组比较,卵巢癌SW626细胞的增殖受到明显抑制,各检测点OD值显著升高(P0.05)。②空白对照组和阴性对照组比较差异无显著性意义(P0.05)。③实验组S1和S2组比较差异无显著性意义(P0.05)。 结论:应用RNA干扰技术能特异性抑制人卵巢癌细胞的CXCR4蛋白的表达和抑制卵巢癌细胞的增殖,证实了应用RNA干扰技术能够抑制CXCR4基因表达的可行性。因此,本实验针对CXCR4基因构建的siRNA能有效的封闭CXCR4的表达,抑制卵巢癌细胞增殖,提示RNA干扰可能用于特异性阻断CXCR4表达,这提示针对CXCR4基因的RNA干扰技术有望成为卵巢癌基因治疗的新靶点。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 赵家伟,刘志达,蒋滢;人卵巢癌HO-8910细胞系胞内多胺水平的动态变化[J];苏州医学院学报;1998年01期
2 王慧香;李荷莲;孙伟;;应用差异凝胶电泳对卵巢癌顺铂化疗耐药的蛋白组学研究[J];中华医学杂志;2006年27期
3 薛开先,曾昭暄,马国建,彭素荣,陈森清,吴建中;多重癌基因改变在良、恶性卵巢等妇科肿瘤的比较研究[J];癌变畸变突变;1997年02期
4 ;卵巢肿瘤[J];国外科技资料目录(医药卫生);2000年03期
5 许沈华,牟瀚舟,吕桂泉,朱赤红,羊正炎,高永良,楼洪坤,刘祥麟,程勇,杨文;高低转移人卵巢癌细胞系基因表达谱差异(英文)[J];Chinese Medical Journal;2002年01期
6 刘晓英;符淳;;雌激素影响卵巢癌细胞系COC1/DDP顺铂耐药的蛋白质双向凝胶电泳图谱分析[J];热带医学杂志;2006年04期
7 ;院校新闻[J];中国高校科技与产业化;2008年08期
8 魏丽惠,李自新,虞幸,田明泉,苑金梅;人卵巢癌裸鼠移植瘤传代生长的观察研究[J];北京大学学报(医学版);1989年01期
9 孙慧;战忠利;宁连胜;王垣;高进;;人卵巢癌裸鼠移植模型的建立和形态学观察[J];中国肿瘤临床;1992年06期
10 ;卵巢肿瘤[J];国外科技资料目录(医药卫生);1999年05期
11 李佩茵,林晨;人卵巢癌细胞阿霉素耐药株的建立及其耐药机制的探讨[J];药学学报;1995年04期
12 符淳;李光仪;林秋华;周灿权;;雌激素影响卵巢癌细胞系COC1顺铂耐药的相关机制[J];中国现代医学杂志;2006年13期
13 崔澂;郝淑维;李保红;胡建军;张爱霞;程建新;单保恩;;IL-18、ICE在人卵巢癌组织中的表达[J];中国免疫学杂志;2008年09期
14 李林霞;李双弟;杨懿霞;万小平;;miRNA-200c在上皮性卵巢癌细胞株及肿瘤组织中的表达变化及意义[J];第二军医大学学报;2011年06期
15 李佳平,卞度宏;人卵巢癌多药耐药细胞株的建立及初步鉴定[J];现代妇产科进展;2001年01期
16 陈爱平,刘晖,徐冰,戴淑真;bcl-xs基因对卵巢癌的作用及其凋亡机制的研究[J];中国肿瘤生物治疗杂志;2003年01期
17 ;妇 科[J];中国医学文摘(肿瘤学);2003年04期
18 菲琳;;卵巢癌并非无声杀手[J];国外医学情报;2002年04期
19 钱丽娟,许沈华,牟瀚舟,高永良;高转移的人卵巢癌细胞遗传学研究[J];实验动物科学与管理;1996年03期
20 ;卵巢肿瘤[J];国外科技资料目录(医药卫生);1998年03期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 朱亚飞;高国兰;熊丽娟;刘福军;;血清人附睾分泌蛋白-4(HE-4)对人卵巢癌诊断价值的Meta分析[A];中国抗癌协会妇科肿瘤专业委员会第十一届全国学术会议论文汇编[C];2011年
2 杨辉;赵荣庆;李文亮;;荷人卵巢癌裸鼠~(99)Tc~m-COC183B2放射免疫显像观察[A];中华医学会第九次全国核医学学术会议论文摘要汇编[C];2011年
3 张艳玉;高国兰;高军;王芬;;不良心理应激对人卵巢癌裸鼠血清sIL-2R,VEGF,CA125的影响[A];中国抗癌协会妇科肿瘤专业委员会第十一届全国学术会议论文汇编[C];2011年
4 姜达;武巧丽;;洛伐他汀对人卵巢癌SKOV3细胞株的体外作用及其机制研究[A];第五届全国中医药免疫学术研讨会——暨环境·免疫与肿瘤防治综合交叉会议论文汇编[C];2009年
5 钱丽娟;顾琳慧;朱赤红;凌雨田;张鸿未;;吉西他滨联合放射对人高转移卵巢癌细胞的体外实验研究[A];浙江省生理科学会2006年学术年会论文汇编[C];2006年
6 钱丽娟;顾琳慧;朱赤红;凌雨田;张鸿未;;吉西他滨联合放射对人高转移卵巢癌细胞的体外实验研究[A];第四届中国肿瘤学术大会暨第五届海峡两岸肿瘤学术会议论文集[C];2006年
7 蒋茂荣;孙怀昌;李厚达;;人内皮抑素基因治疗人卵巢癌裸鼠移植瘤初探[A];中国实验动物学会第六届学术年会论文集[C];2004年
8 周莉;王汉楚;郑飞云;施孟如;;应用双向凝胶电泳分析掌叶半夏总蛋白对人卵巢癌SKOV3细胞蛋白质表达谱的影响[A];2011年浙江省妇产科学学术年会暨“妇产科常见疾病的临床研究新进展”学习班论文汇编[C];2011年
9 刘红霞;常淑芳;孙江川;;超声联合LHRHa紫杉醇微泡诱导卵巢癌细胞株A2780/DDP凋亡的研究[A];2011中国妇产科学术会议暨浙江省计划生育与生殖医学学术年会暨生殖健康讲习班论文汇编[C];2011年
10 卢丽娜;王汉平;谢健晋;毛平;;卵巢癌相关基因筛选的初步研究[A];纪念卓越的人民医学家林巧稚大夫诞辰100周年——全国妇产科高级学术论坛论文集[C];2001年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 李艳;裸鼠荷人卵巢癌皮下移植瘤模型的建立及药效研究和基因突变的检测[D];天津医科大学;2012年
2 谷超;单克隆抗体A3D8对三种人卵巢癌CSC-LCs生物学行为的影响及机制的初步研究[D];天津医科大学;2012年
3 于慧美;多功能蛋白p62在人卵巢癌细胞耐药中的作用及其机制的研究[D];吉林大学;2011年
4 杜湧瑞;人卵巢癌干祖/细胞的分离、鉴定及抗CD44 单克隆抗体对其生物学行为影响的研究[D];天津医科大学;2009年
5 邢艳;hCG对人卵巢癌3AO细胞增殖凋亡的影响及其与LH/hCG受体的关系的研究[D];四川大学;2003年
6 陈旭;异常Notch3通路在人卵巢癌发病机制中的作用研究[D];华中科技大学;2011年
7 何俏军;DL111-IT的抗肿瘤作用及其机制研究[D];浙江大学;2005年
8 何凯;抑制NF-κB因子活化对卵巢癌COC1/DDP耐药性的影响[D];吉林大学;2007年
9 孙艳;Survivin对胃源性及原发性卵巢癌生物学行为影响的实验研究[D];河北医科大学;2008年
10 王玫;肿瘤抑素抗肿瘤相关肽治疗卵巢癌的研究[D];吉林大学;2008年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 武加利;人卵巢癌干细胞的分离培养和初步鉴定[D];青岛大学;2011年
2 王子熹;角果木提取物对人卵巢癌裸鼠皮下转移瘤的作用研究[D];青岛大学;2013年
3 白军;紫花牡荆素对体外培养卵巢癌HO-8910细胞增殖和凋亡的影响[D];南华大学;2011年
4 张骄;人卵巢癌高转移细胞株裸鼠原位移植瘤模型的建立[D];重庆医科大学;2010年
5 梁梦;甲基莲心碱对人卵巢癌顺铂耐药逆转的体外研究[D];桂林医学院;2010年
6 陆冰颖;2-脱氧-D-葡萄糖对人卵巢癌SKOV-3增殖的影响[D];苏州大学;2013年
7 张安莉;抗HER-2抗体对人卵巢癌血管生成的影响[D];安徽医科大学;2010年
8 唐敏;紫花牡荆素对人卵巢癌HO-8910细胞活性氧生成和凋亡的影响[D];南华大学;2012年
9 王丹;双氢青蒿素对人卵巢癌Skov3细胞的调控及机制的初步研究[D];南昌大学医学院;2013年
10 董潇;~(131)碘—标记曲妥株单抗对高表达HER-2/neu人卵巢癌的实验研究[D];苏州大学;2010年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978