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人体氧化还原态与中医阴阳平衡的关系初探

陈蓉  
【摘要】:目的:通过检测血液中重要的两对氧化还原对:谷胱甘肽(Glutathion)氧化型/还原型(GSSG/GSH)和辅酶Ⅱ(coenzymeⅡ)氧化型/还原型(NADP+ /NADPH)水平,来反映西医(A组)和中医健康人群(B组)机体的氧化还原态,并探讨氧化还原态与中医阴阳平衡之间的关系。 方法:分别按西医和中医正常成人健康基本标准选择年龄20-29、30-39、40-49、50岁以上,男、女各半;共400人,清晨采空腹静脉血3ml。(1)在近中性的条件下二硫苏糖醇(DTT)将血浆中的GSSG还原为还原型GSH,在pH8.0时,还原型GSH与荧光探针邻苯二甲醛(OPA)缩合成可发强荧光的物质异吲哚,对已有荧光分光光度法测定GSH含量进行改进,更准确快速检测血浆GSH含量。(2)NADPH作为递氢体在吩嗪硫酸甲酯(PMS)的作用下,使甲基噻唑基四唑(MTT)还原为甲肷(Formazan),同时生成的NADP+再次经葡萄糖-6-磷酸(G6P)在6-磷酸葡萄糖脱氢酶(G6PD)作用下还原生成NADPH,再使MTT还原为甲肷,在此循环反应不同阶段甲肷生产率与辅酶Ⅱ的含量成正比。利用分光光度法测定甲肷吸光度值的变化率对辅酶Ⅱ定量。 结果:(1)相同年龄段A、B组男女性之间结果相同:GSH、GSSG含量、GSH/GSSG比值、Eh(GSH / GSSG)值、NADPH、NADP+含量、NADPH/NADP+比值、Eh(NADPH/NADP+)值均无明显差异(P0.05)。(2)A组与B组各年龄段结果相同: 20-29和30-39年龄段血浆中GSH、GSSG含量、GSH/GSSG比值、Eh(GSH / GSSG)值、NADPH、NADP+含量、NADPH/NADP+比值、Eh(NADPH/NADP+)值无明显差异(P0.05);40-49和50以上年龄段血浆中GSH、NADPH含量明显比前两个年龄段低(P0.05),GSSG、NADP+含量、GSH/GSSG比值、NADPH/NADP+比值、Eh(GSH / GSSG)值、Eh(NADPH/NADP+)值比前两个年龄段明显增高(P0.05)。且50以上年龄段较40-49年龄段GSH、NADPH含量更低,GSSG、NADP+含量、GSH/GSSG比值、Eh(GSH / GSSG)值、h(NADPH/NADP+)值更高。 结论:(1)本研究利用荧光探针OPA与GSH的反应,改良了荧光分光光度法测定血浆中GSH的方法,使之更快速而准确地测定血浆中GSH的含量。(2)机体阴阳平衡状态与氧化还原态平衡密切相关,中医和西医健康人群相同年龄段机体均维持恒定的氧化还原状态,男女性别间无差异。(3)40岁以前,机体氧化还原态平衡无明显改变,40岁以后,随着年龄增高,机体抗氧化能力逐渐降低,氧化还原态平衡逐渐向氧化方向偏移,提示40岁可能是人体开始衰老的转折点。


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