收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

HSP70/CD80 DNA疫苗通过调节趋化因子及受体干预哮喘小鼠气道炎症的研究

郭宇  
【摘要】:目的:支气管哮喘(哮喘)是一种复杂的气道炎症性疾病,其主要病理特点是气道炎症,气道高反应性(airway hyperreactivity, AHR)和气道重塑。哮喘发病过程中涉及多种炎症细胞和介质对气道的作用,主要包括嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、嗜中性粒细胞、肥大细胞、淋巴细胞等。而在这些炎症细胞活化和迁移过程中,趋化因子发挥着重要作用。根据辅助性T细胞(Th细胞)产生细胞因子的类型分为Th1和Th2型,近年来研究认为辅助性T淋巴细胞的两种亚型Th1和Th2的失衡是哮喘最重要的发病机制。Th细胞可能表达不同的趋化因子受体,使得它们向不同组织趋化。分别用IL-12和IL-4将初始T细胞分化为Th1和Th2细胞型,出现了两种趋化因子受体的表达模式:Th1细胞表达CCR5和CXCR3,而Th2细胞表达CCR3, CCR4和CCR8。本实验意在讨论是否可以通过调节哮喘发病过程中趋化因子及趋化因子受体来调节Th1/Th2的平衡,以达到治疗哮喘的目的。我们以鸡卵清蛋白(ovalbumin OVA)致敏小鼠,建立急性哮喘小鼠模型,观察HSP70/CD80DNA疫苗对急性哮喘小鼠气道炎症和气道高反应性的治疗作用,并进一步探讨其可能的机制。 方法:大量提取pVAX1质粒和HSP70/CD80DNA质粒,测定所提质粒含量和纯度,并进行酶切鉴定。将40只健康雌性BALB/c小鼠随机分为4组,每组10只:对照组(A组)、哮喘组(B组)、pVAX1载体组(C组)和HSP70/CD80DNA疫苗组(D组)。以OVA致敏小鼠,建立小鼠急性哮喘模型。C组和D组经股四头肌肌肉分别注射pVAX1质粒和HSP70/CD80DNA疫苗;A组与B组注射相同剂量生理盐水。末次OVA激发后24h,通过全身体积描记仪检测吸入乙酰甲胆碱(methacholine, MCh)检测小鼠气道反应性高低。眼眶采血用ELISA方法检测外周血IgE含量。HE染色下观察小鼠肺组织病理变化;PAS染色观察杯状细胞增生和黏液分泌情况;免疫组化检测CCL5和CCL17抗原在气道的分布及表达情况。Real-Time PCR检测肺脏组织CCR5和CCR4基因的表达水平。 结果:1.小鼠气道反应性:用不同浓度MCh刺激后,与A组相比,B组和C组小鼠的气道反应性明显增高,而D组有所降低。在MCh浓度达24mg/ml后,B组和C组小鼠气道反应性显著高于A组(P0.05),而D组小鼠气道反应性低于B组开始有明显差异(P0.05)。 2.肺组织病理学改变:在肺HE染色病理切片中,B组和C组小鼠支气管、血管周围和肺泡有明显炎细胞浸润,其中以嗜酸性粒细胞和淋巴细胞为主。而在D组,HSP70/CD80DNA疫苗能有效抑制气道、血管周围和肺泡的炎细胞浸润(P0.05);在肺切片PAS染色中,B组和C组小鼠气道上皮中杯状细胞增生肥大,PAS着色细胞明显增加,管腔中有大量黏液形成,A组和D组PAS阳性细胞及管腔内的黏液分泌明显少于B组和C组(P0.05)。 3.血清IgE浓度变化:与A组比较,B组和C组小鼠血清IgE含量明显升高(P0.05);与B组相比,D组小鼠血清IgE含量降低(P0.05)。 4.免疫组化检测肺组织CCL5和CCL17蛋白表达情况:免疫组化显示CCL5和CCL17蛋白主要表达于支气管上皮细胞。在CCL5免疫组化中,A组和D组表达明显增多呈呈阳性或强阳性, B组和C组表达呈弱阳性;在CCL17免疫组化中,B组和C组表达明显增多呈阳性或强阳性(P0.05),与B组比较,A组和D组表达呈阴性或弱阳性(P0.05)。 5.Real-Time PCR法检测肺组织CCR5和CCR4的基因表达水平:B组和C组CCR5mRNA表达较A组降低;与B组和C组比较,D组CCR5mRNA表达增加(P0.05)。与A组比较,B组和C组肺组织CCR4mRNA表达增加(P0.05);与B组相比,D组肺组织CCR4mRNA表达减少(P0.05)。 结论:1.本实验用OVA致敏小鼠,建立小鼠急性哮喘模型,小鼠出现气道炎症反应,气道高反应性,模型建立成功。2.在哮喘模型基础上,使用HSP70/CD80DNA疫苗处理可减轻气道炎症反应,减少粘液分泌,降低气道阻力。3.另外,结果显示HSP70/CD80DNA疫苗可增强CCL5在气道上皮中的表达,减少CCL17表达;HSP70/CD80DNA疫苗还可通过上调CCR5抑制CCR4,使CCR5/CCR4升高,从而恢复Th1/Th2平衡,起到治疗哮喘的作用,为该疫苗作为新型免疫调节性疫苗提供新的实验基础。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 李燕;夏晓群;史小玲;王晓燕;唐利;陈枫;钟森;陈庄;;HSP70/CD80 DNA疫苗对哮喘小鼠气道重构的治疗及机制[J];实用医学杂志;2013年16期
2 黄伟,张中和;从外周气道炎症的存在看哮喘的研究现状[J];医学与哲学;2002年01期
3 袁亚平;万欢英;;气道炎症标记在哮喘诊治中的意义[J];临床肺科杂志;2007年02期
4 陈文彬;气道炎症与慢性阻塞性肺疾病[J];中华内科杂志;1999年04期
5 李晓露;张翊玲;马丽;张湘燕;;sPLA2-X在支气管哮喘中的研究进展[J];中外医疗;2018年11期
6 姚润伟;;哮喘患者气道炎症表型分布及肺功能分析[J];广州医药;2019年01期
7 李燕;谢敏;史小玲;王晓燕;唐利;钟森;陈庄;;HSP70/CD80 DNA疫苗通过调节Th1/Th2/Treg/Th17细胞对小鼠急性哮喘的抑制作用[J];山东大学学报(医学版);2014年10期
8 谭磊;颛孙永勋;李建国;黄凤婷;林琳;刘仕欣;;骨髓间充质干细胞移植对哮喘小鼠气道炎症及气道重塑的影响[J];深圳中西医结合杂志;2015年10期
9 周云冲;防哮喘打疫苗正是好时节[J];中国社区医师;2002年21期
10 赵文娟;陈静;邢海晶;袁嘉丽;韩妮萍;;三七总皂苷调节哮喘小鼠气道炎症的免疫分子机制研究[J];现代中西医结合杂志;2015年04期
11 张明;陈娜;;雾化吸入痰热清对哮喘小鼠气道炎症的影响[J];山东医药;2007年23期
12 涂海燕,杨炯湖,李清泉;小剂量茶碱对哮喘患者气道炎症的作用[J];中华结核和呼吸杂志;2000年12期
13 倪耀军;陈胜;陈亮;;哮喘始发年龄对哮喘临床特征和气道炎症的影响[J];实用医学杂志;2013年12期
14 姚露;;TB疫苗可预防哮喘[J];国外医学情报;2003年05期
15 吴锐,李立宇;倍氯米松吸入对哮喘患者气道炎症的治疗作用[J];山西临床医药;1998年06期
16 韩秀霞;;可为治疗带来希望的哮喘疫苗[J];国外医学情报;1999年11期
17 郑洁;张欣;郑静;王刚;;肥胖与支气管哮喘控制水平及气道炎症表型的关系[J];中国呼吸与危重监护杂志;2015年06期
18 姜岩;英国初步研制成功哮喘疫苗[J];医学信息;1997年08期
19 袁秉煃;哮喘患儿能接种疫苗吗[J];家庭医学;2005年05期
20 周阿旺;戴元荣;沈雪艳;陈志华;沈华浩;;支气管哮喘气道炎症和哮喘控制与肺炎支原体感染的相关性研究[J];中国实用内科杂志;2014年08期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 李燕;郭宇;史小玲;王晓燕;唐利;陈枫;钟森;陈庄;;HSP70/CD80 DNA疫苗通过调节趋化因子及受体对哮喘小鼠气道炎症的作用[A];2012全国临床微生物与感染免疫学术研讨会论文集[C];2012年
2 李燕;谢敏;史小玲;王晓燕;唐利;钟森;陈庄;;HSP70/CD80 DNA疫苗通过调节Th1/Th2/Treg/Th17平衡对小鼠急性哮喘的作用[A];第九届全国免疫学学术大会论文集[C];2014年
3 李昌崇;郑吉善;苏苗赏;张维溪;罗运春;李孟荣;董琳;陈小芳;蔡晓红;张正霞;;胸腺活化调节趋化因子及其受体CCR4在哮喘小鼠气道炎症中的作用[A];2006(第三届)江浙沪儿科学术会议暨浙江省儿科学术年会论文汇编[C];2006年
4 张敏;武莉莉;施睿;刘琰;方智野;邓海燕;郑明星;高波;袁丽芬;;吸烟对哮喘患者气道炎症及临床疗效的影响[A];第六次全国中西医结合变态反应学术大会论文汇编[C];2013年
5 王长征;;哮喘的气道炎症表型[A];中华医学会呼吸病学年会——2011(第十二次全国呼吸病学学术会议)论文汇编[C];2011年
6 王鹏;沈华浩;黄华琼;徐卫华;李小波;李雯;高桂新;李阿娜;张双美;;卵白蛋白致敏时减毒活菌卡介苗干预对哮喘小鼠气道炎症的影响[A];华东地区第6届中青年呼吸医师论坛暨浙江省第29届呼吸疾病学术年会论文汇编[C];2007年
7 欧阳海峰;吴昌归;;外源性骨髓间充质干细胞对哮喘小鼠气道炎症的抑制作用[A];中华医学会呼吸病学年会——2011(第十二次全国呼吸病学学术会议)论文汇编[C];2011年
8 黄芸;欧阳海峰;王文雅;吴硕;吴昌归;;骨髓间充质干细胞参与哮喘小鼠气道炎症及其机制的研究[A];中华医学会第七届全国哮喘学术会议暨中国哮喘联盟第三次大会论文汇编[C];2010年
9 李燕;谢敏;史小玲;王晓燕;唐利;钟森;陈庄;;HSP70/CD80 DNA疫苗通过调节Th1/Th2/Treg/Th17细胞对急性哮喘小鼠的抑制作用[A];中华医学会2014全国微生物学与免疫学学术年会论文汇编[C];2014年
10 欧阳海峰;吴昌归;;外源性骨髓间充质干细胞对哮喘小鼠气道炎症的抑制作用[A];中华医学会第七届全国哮喘学术会议暨中国哮喘联盟第三次大会论文汇编[C];2010年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 李艳春;白细胞介素-23对哮喘小鼠记忆T细胞增殖功能的影响[D];吉林大学;2013年
2 张晓岩;外周血细胞对哮喘气道炎症表型的预测价值及难治性哮喘气道炎症表型和临床特征的研究[D];北京协和医学院;2014年
3 黄希骥;血浆细胞因子表达水平及尿中金属、多环芳烃暴露水平与成人哮喘的关联性研究[D];华中科技大学;2016年
4 张钰群;团体认知行为治疗干预哮喘的疗效机制[D];东南大学;2017年
5 王晗;住宅室内环境对儿童哮喘的健康风险评估[D];重庆大学;2016年
6 贾煜;戴裕光临证经验总结及治疗儿童哮喘的临床研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2009年
7 李文磊;CCL5及受体CCR5,MMP-9的表达与乳腺癌临床病理相关性研究[D];山东大学;2016年
8 李晓梅;IL-33在呼吸道合胞病毒感染SD幼鼠气道炎症中的作用研究[D];山东大学;2018年
9 赵俊;长链非编码RNA RP11-86H7.1在交通相关PM 2.5致气道炎症中的作用及其机制研究[D];广州医科大学;2018年
10 田代印;IL-4受体拮抗体对哮喘小鼠气道炎症及Th失衡干预作用的实验研究[D];重庆医科大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 郭宇;HSP70/CD80 DNA疫苗通过调节趋化因子及受体干预哮喘小鼠气道炎症的研究[D];泸州医学院;2012年
2 郑洁;肥胖与支气管哮喘控制水平及气道炎症表型的关系[D];成都中医药大学;2015年
3 刘秀美;核因子κB系统在哮喘小鼠气道炎症中的作用及中药对其干预的研究[D];青岛大学;2010年
4 韩征利;不同治疗方法对哮喘小鼠气道炎症及重塑影响的研究[D];青岛大学;2011年
5 刘泽宇;哮喘患者肺部γδT淋巴细胞的变化和对气道炎症的影响[D];中国协和医科大学;2008年
6 王欠欠;对哮喘—慢性阻塞性肺疾病重叠综合征临床特征及药物疗效的临床观察[D];吉林大学;2017年
7 陈凯;乙酰半胱氨酸对在肥胖哮喘小鼠气道炎症和重建的作用[D];泰山医学院;2011年
8 张晓磊;白三烯受体拮抗剂治疗吸烟哮喘患者的疗效评价及机制研究[D];郑州大学;2016年
9 崔艳芝;支气管哮喘与小气道炎症[D];山西医科大学;2009年
10 沈明;吸烟对支气管哮喘患者吸入糖皮质激素治疗效果的影响[D];中国医科大学;2010年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 华;专家提出——治疗哮喘重在控制气道炎症[N];医药经济报;2000年
2 陈志春;使用哮喘疫苗该注意些啥?[N];上海中医药报;2009年
3 ;与哮喘作战[N];文汇报;2015年
4 何权瀛;控制哮喘别拒绝激素[N];健康报;2006年
5 北京朝阳医院呼吸科 副主任医师 逯勇 通讯员 吴玉华;正确对待激素治疗哮喘[N];家庭医生报;2008年
6 北京朝阳医院呼吸疾病研究所 逯勇 黄克武;哮喘患者 吸入激素要持续[N];健康报;2011年
7 中南大学湘雅二医院呼吸内科 副教授 欧阳若芸;秋冬防哮喘 科学来选药[N];家庭医生报;2009年
8 本报记者 张锐 衣晓峰 通讯员 郑文韬;防治哮喘顽疾正当时[N];中国中医药报;2018年
9 上海交通大学医学院附属瑞金医院呼吸科主治医师 主任医师 陈巍 万欢英;哮喘夜间频发,积极治疗有方法[N];文汇报;2012年
10 唐夏;一味贪凉会引起哮喘复发[N];中国消费者报;2008年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978